[发明专利]一种白蘑科真菌培养基及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物培养技术领域，具体涉及一种白蘑科真菌培养基及其制备方法和应用。 

背景技术

白蘑科真菌，属层菌纲伞菌目，是一类分布广泛的真菌。白蘑科真菌有大量富有经济价值的品种，其大多具有味道鲜美的子实体，部分品种具有较高的药用价值，具体如奥德蘑属真菌、金针菇属真菌、杯伞属真菌、柄伞属真菌、蜜环菌属、小蜜环菌属真菌等。对白蘑科培养的研究，具有良好的经济前景。 

以白蘑科小蜜环菌属的假蜜环菌（Armillariella tabescens (Scop. : Fr.) Sing. ）为例，假蜜环菌是亚洲特有菌种，可药食兼用。中医认为，该菌性寒、味甘，有强筋壮骨、舒风活络、明目、利肺、益肠胃等保健功效。现代研究表明，用乙醇、乙酸乙酯提取可得到假蜜环菌甲素、假蜜环菌乙素、假蜜环菌丙素,其多糖成分据报道具有抗肿瘤和免疫调节活性，也有报道该菌对霉菌毒素具有一定解毒作用，因此对假蜜环菌的大规模培养具有广阔的应用前景。 

目前，国内对假蜜环菌的工业培养工艺的优化研究较少。中国协和医科大学的翟京辉利用葡萄糖，可溶性淀粉，蛋白胨，硝酸铵和玉米粉为原料，对各原料组分进行优化设计出液体培养基，对其接种假蜜环菌后进行摇床培养，每升培养基最多可获得增长的生物量18g；四川大学的罗霞使用葡萄糖，蔗糖，蛋白胨，酵母膏，K₂HPO₄， KH₂PO₄，MgSO₄作为原料制备培养基，每升培养基最多能获得7.63g的生物量增长。可见现有的假蜜环菌培养基大多存在淀粉用量低的问题，其碳源大多采用葡萄糖、麦芽汁等实现，成分复杂而成本较高，不适宜用于大规模的工业生产。 

而为了提高培养基的出产率以及淀粉利用率，现有的研究大多从优化其碳氮比、改变其无机盐成分入手，但这些优化对出产率的提升效果并不明显。 

蜜环菌属同样存在淀粉利用率低的问题。 

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种产率高、成本低廉、适于大规模工业生产白蘑科真菌的培养基。 

本发明的目的通过以下技术方案实现： 

一种白蘑科真菌培养基，其原料包括占培养基原料总重0.01%-20%的多不饱和脂肪酸。

优选的，所述白蘑科真菌为小蜜环菌属真菌或蜜环菌属真菌。 

特别对于小蜜环菌属和蜜环菌属的真菌，添加多不饱和脂肪酸后，单位培养基中的生物量增长也有较大的涨幅。培养基中的其他成分可选用任一种适用于小蜜环菌属或蜜环菌属真菌的培养基配方，经发明人验证，添加多不饱和脂肪酸后单位培养基的小蜜环菌和蜜环菌属真菌的生物量增幅最多可达到未添加多不饱和脂肪酸培养基的4倍以上，其分泌的代谢产物数量也大幅增长。如假蜜环菌，在采用被发明提供的培养基培养后，其来源于假蜜环菌的次生代谢产物——假蜜环菌多糖在发酵液中的浓度也有显著提升。对上述效果均未见有相关报道存在。[Y1]  

进一步的，所述多不饱和脂肪酸为碳链长度18-22的直链脂肪酸，其不饱和键数量为2-6个。

18-22的直链多不饱和脂肪酸能够达到对小蜜环菌属及蜜环菌属真菌生产促进作用的最大值，而不饱和键数量在2-6个时，多不饱和脂肪酸的成本方较为适宜应用于工业化生产中，虽机理尚未明确，但有已在实践中获得证明。 

优选的，所述多不饱和脂肪酸为花生四烯酸/亚油酸/共轭亚油酸/α-亚麻酸/γ-亚麻酸/全顺式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸/全顺式-5,8,11,14,17-二十碳五烯酸中的一种或多种的混合。。 

本发明所称多不饱和脂肪酸均为市售产品。上述的多不饱和脂肪酸添加至培养基中后，均能产生上述对真菌生长的促进作用，且较为易于获得而价格低廉。其中，亚油酸的价格最高，但在中试时，等价值的亚油酸的效果更为明显，故其用量更少。因此，在各种多不饱和脂肪酸中，亚油酸更适宜投入大规模的工业生产中。因此本发明中可特别将所述多不饱和脂肪酸优选为亚油酸。本发明所称亚油酸，可通过任一种市售产品实现。但本发明并不排除因技术进步导致原料成本下降，进而可将其他多不饱和脂肪酸作为本发明的优选方案。 

优选的，所述培养基其原料还包括占培养基原料总重10-20%的马铃薯、1%-2%的蔗糖及余量的水。