[发明专利]一种雨城丹桂愈伤组织分化及增殖方法有效
申请号: | 201310725163.1 | 申请日: | 2013-12-25 |
公开(公告)号: | CN103733998A | 公开(公告)日: | 2014-04-23 |
发明(设计)人: | 王良桂;杨秀莲;王亚莉;张春霞;凌敏 | 申请(专利权)人: | 南京林业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 邱兴天 |
地址: | 210037 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 丹桂 组织 分化 增殖 方法 | ||
1.一种雨城丹桂愈伤组织分化及增殖方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)从健康茁壮的雨城丹桂树上,选取盛花期时的新鲜花梗,进行消毒处理;
2)无菌条件下,将处理后的材料接种于诱导及分化培养基上,温度25±1℃,全黑暗条件下,培养至分化;其中,诱导及分化培养基为:B5+6-BA2.0~3.0mg/L+2,4-D0.05mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L,pH5.5;
3)将已分化的愈伤组织接种于增殖培养基中,温度25±1℃,光照时间为12h/天,光照强度为2500lx,25天继代增殖一次,即可;其中,增殖培养基为:B5+6-BA3.0mg/L+NAA0.10mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L,pH 5.5。
2.根据权利要求1所述的雨城丹桂愈伤组织分化及增殖方法,其特征在于:步骤1)中,从健康茁壮的雨城丹桂树上选取盛花期时的新鲜花梗,先用加入少量去污粉的自来水浸泡1小时,然后用流水冲洗3小时;在水平超净工作台的无菌条件下,将冲洗过的花梗在75%的酒精中浸泡30秒后,在2%的次氯酸钠溶液中浸泡3分钟,再用无菌水仔细冲洗5遍。
3.根据权利要求1所述的雨城丹桂愈伤组织分化及增殖方法,其特征在于:步骤2)中,诱导及分化培养基为:B5+6-BA2.0mg/L+2,4-D0.05mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.8g/L,pH5.5。
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