[发明专利]降低含油佐剂和含表面活性剂抗原之间的干扰

说明书

本申请是国际申请PCT/IB2006/002581，国际申请日2006年8月2日，中国国家阶段申请号200680034084.4的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及生产含佐剂疫苗的领域。具体说，本发明涉及在生产基于含表面活性剂抗原的疫苗的过程中使用脂肪族佐剂。

背景技术

采用佐剂能提高对疫苗抗原的免疫应答是众所周知的(参见例如参考文献1和2)。许多年以来，批准人用的唯一佐剂是铝盐，但许多国家已经批准了含有MF59佐剂和RC-529佐剂的疫苗，包括意大利(在希龙公司(Chiron)的FLUAD^TM产品中)和阿根廷(在伯纳生物科技公司(Berna Biotech)的SUPERVAX^TM产品中)。处于后期人用实验阶段的其它佐剂包括胆固醇和皂苷、ISCOM、MPL^TM、AS04、病毒颗粒、SBA4等的混合物。

一些铝盐替代物的共有特征是存在脂肪族组分。例如，MF59佐剂包含鲨烯(油)，MPL^TM包含带有多个脂肪酸链连接于二葡糖胺主链的脱酰基化形式的单磷酰基脂质A。

本发明涉及避免这些脂肪族佐剂和含有表面活性剂组分的抗原之间可能发生的干扰。

发明概述

本发明者发现，疫苗组合物中的脂肪族佐剂可能与含有表面活性剂组分的抗原不相容。然而，在许多情况下，仍然需要合并脂肪族佐剂和抗原/表面活性剂混合物，本发明的目的之一是提供避免这样做的过程中可能产生的困难的方式。另一目的是提供合并佐剂和抗原的方法，该方法可以避免不相容。

为了避免使用一般采用表面活性剂纯化的抗原时的这些不相容问题，本发明的第一个方面提供了一种制备免疫原性组合物的方法，其中：(a)该组合物含有抗原和脂肪族佐剂；和(b)在不存在表面活性剂的情况下基本纯化该抗原。采用避免使用表面活性剂的替代方法来纯化抗原，可解决对脂肪族佐剂的任何不相容性问题。

然而，出于临床、历史或法规原因，可能无法在不采用表面活性剂的情况下纯化抗原，或者完全去除疫苗中的表面活性剂。在这种情况下，本发明通过降低组合物中油与表面活性剂的比例避免了干扰。典型MF59/HBsAg疫苗所含的油量远高于表面活性剂，油与表面活性剂的比例超过4000:1(重量比)。本发明的目标是最大程度减少组合物中脂肪族佐剂的含量，在第二方面，本发明采用的油量为至多重量过量1000倍。因此，本发明提供了一种制备免疫原性组合物的方法，所述方法包括合并(i)含有表面活性剂的抗原组分和(ii)脂肪族佐剂组分的步骤，以得到所述脂肪族佐剂与所述表面活性剂的重量比小于1000:1的组合物。相似地，本发明提供了免疫原性组合物，其中：(a)所述组合物含有抗原组分和脂肪族佐剂组分；(b)所述抗原组分含有表面活性剂；和(c)所述脂肪族佐剂与所述表面活性剂的重量比小于1000:1。

脂肪族佐剂

本发明的第一和第二方面都使用了脂肪族佐剂，即含有脂肪族分子的佐剂组分。典型的脂肪族佐剂含有可代谢油、脂肪酸和/或含有脂肪酸部分的分子。

两种优选脂肪族佐剂是称为'MF59'和'MPL'的佐剂。'MF59'是脂肪族佐剂，因为其含有作为可代谢油的鲨烯。'MPL'是脂肪族佐剂，因为它含有用多个脂肪酸链取代的二糖。除MF59以外，还可采用其它水包油乳剂佐剂。

因此，本发明优选组合物包含：(a)水包油乳剂，如含有鲨烯和聚氧乙烯山梨聚糖单油酸酯(任选为山梨聚糖三油酸酯)的亚微米水包油乳剂；和/或(b)3-O-脱酰基化的单磷酰基脂质A。聚氧乙烯山梨聚糖单油酸酯也称为聚山梨酯80。

除'MF59'和'MPL'以外，可用于本发明的其它脂肪族佐剂包括但不限于：氨基葡萄糖苷磷酸酯衍生物；N-酰基-假二肽；来源于大肠杆菌(Escherichia coli)脂质A的可溶性佐剂'OM-174'；含有连接于含磷酸无环主链的脂质的化合物；和无环合成脂质A类似物。