[发明专利]喹啉黄标准样品的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及分析检测技术领域，尤其是一种喹啉黄标准样品的制备方法。

背景技术

喹啉黄（Quinoline Yellow）：CAS号：8004-92-0，分子式：C₁₈H₉NO₈Na₂S₂，分子量：477.38，是水溶性偶氮类合成的食用黄色色素（着色剂），在英国常用于雪糕、水果、蛋糕、巧克力、面包、奶酪酱、软饮料等食品的着色。由于该色素可能导致儿童多动症，日本、美国及挪威禁用于食品，而中国仅允许在预调酒中添加。喹啉黄的结构式如下：

喹啉黄主要以芳烃类化工产品为原料，经过磺化、偶氮化等一系列有机反应化合而成，以不仅无营养价值，而且其化学构成物质本身对人体有害。同时在合成过程中产生的杂质如砷、汞、苯酚、苯胺、铅、镉、乙醚、氯化物、硫酸盐等均有不同程度的毒性。合成着色剂喹啉黄进入人体后会大量消耗体内解毒物质，干扰人体正常代谢功能并直接作用靶器官，其毒性主要表现为不耐受性、致癌性、儿童多动症。基于此，对食品安全的要求日益提高，对喹啉黄的添加量检测越来越受到重视，用于其检测的标准样品的的制备也处于重要地位，因此，亟需制备出一种喹啉黄标准样品，其成分在一定时期内相对稳定，用于对含喹啉黄产品的检测。

发明内容

本发明的目的在于提供一种喹啉黄标准样品的制备方法。该方法制备的喹啉黄标准样品均匀性好、量值准确、稳定性好，可以用于对分析仪器的校准，检测方法的评定和对喹啉黄含量的测定。

本发明所采用的技术方案为：

喹啉黄标准样品的制备方法，其特征是，包括以下步骤：

S1：喹啉黄的高速逆流色谱分离纯化

高速逆流色谱的分离溶剂体系：正丁醇-10%硫酸溶液-水两相溶剂体系；

①准备喹啉黄粗样；

②配制上述正丁醇-10%硫酸溶液-水的两相溶剂体系，充分振摇后静置10-14h，分层，其中，上相作为固定相，下相作为流动相；

③将喹啉黄粗样溶解于两相溶剂体系中，配制成样品溶液；

④将固定相泵入分离柱，待固定相充满管道后，打开主机速度控制器，使高速逆流色谱仪螺旋管柱按照顺时针的方向旋转，当转速达到700-900r/min时，泵入流动相，并通过六通进样阀进样，待流动相开始流出色谱柱时，收集高速逆流色谱分离后的各峰流出液，然后将收集的溶液通过高效液相色谱检测，确定目标成分，检测波长为254nm；从高速逆流色谱上，可以得到最多组分和次多组分分离的信息，然后在高效液相色谱上分析判断，确定目标成分。

S2：喹啉黄样品脱酸

取步骤S1中确定的目标成分，用水溶解后，置于分液漏斗中，然后用等体积的饱和正丁醇萃取三次，合并正丁醇层减压蒸干，然后用10mL水溶解后通过凝胶柱色谱（sephadexLH-20）分离，收集黄色部分，减压浓缩得到目标成分，室温干燥得纯品喹啉黄；即为喹啉黄标准品。

S3：分装与储存

将制得喹啉黄标准品，用棕色瓶进行分装，室温干燥避光密封保存。

优选的，所述正丁醇、10%硫酸溶液、水的体积比为5：1：4。

优选的，所述步骤④中转速为800r/min。

优选的，所述步骤④中固定相泵入分离柱的速度为20mL/min；流动相的泵入速度为2.0mL/min。

优选的，所述步骤③为将喹啉黄粗样溶解于两相溶剂体系中，配制成浓度为25mg/mL的样品溶液。

本发明的优选的技术方案为：

S1：喹啉黄的高速逆流色谱分离纯化

高速逆流色谱的分离溶剂体系：正丁醇-10%硫酸溶液-水两相溶剂体系；

①准备喹啉黄粗样；

②配制上述正丁醇-10%硫酸溶液-水的两相溶剂体系，充分振摇后静置10-14h，分层，其中，上相作为固定相，下相作为流动相，正丁醇、10%硫酸溶液、水的体积比为5：1：4；

③将将粗样200mg溶解于4mL上相和4mL下相的混合溶剂中，配制成样品溶液；

④将固定相以20mL/min的速度泵入分离柱，待固定相充满管道后，打开主机速度控制器，使高速逆流色谱仪螺旋管柱按照顺时针的方向旋转，当转速达到800r/min时，以2.0mL/min的速度泵入流动相，并通过六通进样阀进样，待流动相开始流出色谱柱时，收集高速逆流色谱分离后的各峰流出液，然后将收集的溶液通过高效液相色谱检测，确定目标成分；