[发明专利]一种特异性检测Ⅲ型猪嗜淋巴泡疹病毒的引物对、探针和试剂盒

权利要求书

1.一种特异性检测Ⅲ型猪嗜淋巴泡疹病毒的引物对，包括上游引物和下游引物，其特征在于，所述上游引物PLHV3 D F1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物PLHV3 D R1的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.与权利要求1所述的引物对配合使用的荧光探针，其特征在于，探针PLHV3 D P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述探针的5′端标记有荧光报告基团，3′端标记有荧光淬灭基团。

3.根据权利要求2所述的荧光探针，其特征在于：所述荧光报告基团为FAM、VIC中的任一种；所述荧光淬灭基团为TAMRA、Eclipse中的任一种。

4.权利要求1所述引物对在制备Ⅲ型猪嗜淋巴泡疹病毒的检测或诊断试剂盒中的应用。

5.一种Ⅲ型猪嗜淋巴泡疹病毒的实时荧光定量检测试剂盒，其特征在于，含有权利要求1所述引物对和权利要求2或3所述的荧光探针。

6.根据权利要求5所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的反应体系为：20μL反应体系的具体配置为纯水13.8μL，10×PCR反应缓冲液2μL，25mM镁离子1.2μL，25mM dNTPs混合溶液 0.5μL，10μM PLHV3 D F1 0.5μL，10μM PLHV3 D R1 0.5μL，20μM PLHV3 D P1 0.3μL，5 u /μL的Taq酶 0.2μL，待测样品DNA模板1μL。

7.根据权利要求5所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的荧光定量PCR扩增条件为：95℃，2min ；95℃，10s ；60℃，40s，共做40 个循环，然后终止。

8.一种利用权利要求5至7任一项所述试剂盒检测供移植猪组织或器官的方法，其特征在于，包括如下步骤：a.从提供待移植器官的活猪体内抽取血液，从血液中提取其总DNA；b.采用权利要求5所述的试剂盒，以总DNA为模板进行实时荧光定量PCR 反应，每个循环结束后采集数据，反应结束后根据扩增曲线和标准曲线判定结果。