[发明专利]一种检验扶正解毒散质量的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药检测技术领域，涉及一种检验扶正解毒散质量的方法。

背景技术

扶正解毒散是根据《中华人民共和国兽药典》2010版二部扶正解毒散项下规定，由黄芪、板蓝根和淫羊藿三味中药按一定比例组合粉碎而成的成方制剂，具有扶正祛邪、清热解毒、补中益气的功效，主治鸡法氏囊病。另外，还可帮助修复免疫细胞功能，诱导机体产生抗干扰素，调整机体免疫功能。

药典中扶正解毒散项下质量标准未规定其各有效成分的鉴别方法和含量测定方法。《中华人民共和国兽药典》2010版二部中扶正解毒散的质量标准只有鉴别及检查项，没有含量测定项。对于兽药复方中药，有效成分的含量测定需要精密的仪器，价格昂贵，很多兽药厂家考虑到成本，很少配置成套的检测仪器，因此含量测定项往往舍去，药品质量控制水平就比较低。

因此，目前需要建立一个完善的扶正解毒散的质量标准及其检测方法来增强该药的质量可控性和稳定性。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供了一种检验扶正解毒散质量的方法。该方法包括扶正解毒散的质量标准及其检验方法，该方法通过建立专属性强的鉴别方法、有效的检查方法及重复性、准确性良好的含量测定方法，能够有效控制该产品的质量，保证其临床使用安全，有效，稳定。

该方法包括检视扶正解毒散的外观均匀度、检视扶正解毒散的微观表面、检测扶正解毒散的粒度、鉴别扶正解毒散中黄芪甲苷、检测扶正解毒散中黄芪甲苷和淫羊藿苷的含量以及检测检测扶正解毒散中的水分。该方法通过建立专属性强的鉴别方法、有效的检查方法及重复性、准确性良好的含量测定方法，能够有效控制该产品的质量，保证其临床使用安全、有效、稳定。

为此，本发明提供了一种检验扶正解毒散质量的方法，包括鉴别扶正解毒散中黄芪甲苷、检测扶正解毒散中黄芪甲苷和淫羊藿苷的含量以及检测扶正解毒散中的水分。

根据本发明方法，鉴别扶正解毒散中黄芪甲苷是采用薄层色谱法，包括以黄芪甲苷作对照样品，以甲醇为溶剂，以13:7:2的三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，分别将2μl对照样品溶液Ⅰ和扶正解毒散待测样品提取物溶液Ⅰ在同一硅胶G薄层板上点样展开，取出、晾干、并喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，然后进行检视；如果检视的结果为待测样品色谱中，在与对照样品色谱相应的位置上，显示与对照样品相同颜色的斑点，即说明待测样品中含有黄芪甲苷。

在本发明的一个实施例中，所述待测样品提取物溶液Ⅰ的制备包括：将8g待测样品与20ml甲醇混合并加热回流1小时，过滤，将所获得的滤液加入中性氧化铝柱（所述氧化铝柱的内径为10～15mm；所述氧化铝的粒径为100～120目，其用量为5g），用100ml40%的甲醇洗脱，并将洗脱液蒸干，所向剩余残渣中加入30ml水使其溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并所获得的正丁醇提取液，用水洗涤2次，每次20ml，将洗涤后正丁醇提取液蒸干，向剩余残渣中加入0.5ml甲醇使其溶解，即得。

在本发明的另一个实施例中，所述对照样品溶液Ⅰ以甲醇为溶剂制得，其浓度为1mg/ml。

根据本发明方法，所述扶正解毒散中黄芪甲苷的含量测定采用高效液相色谱法，包括采用蒸发光散射检测器检测，并以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填充剂，以黄芪甲苷为对照样品，以乙腈-水为流动相，在对照品溶液Ⅱ与待测样品提取物溶液Ⅱ进样后，记录色谱图，用外标两点法对数方程计算扶正解毒散中黄芪甲苷的含量，其中，所述色谱柱的理论塔板数按黄芪甲苷峰计算至少为4000。

在本发明的一个实施例中，在所述流动相中，乙腈与水的体积比为35:65。这种配比的流动相可以使待测样品中的各成分的色谱峰分开，杂质检测明确。

在本发明的另一个实施例中，所述待测样品提取物溶液Ⅱ的制备包括：将10g待测样品置于索氏提取器中，加入40ml甲醇，冷浸过夜，再加入甲醇，加热回流4小时，将所获得的提取液浓缩至干，向剩余残渣中加10ml水，加热到30～40℃使其溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇提取液，用浓度为40vol.%的氨水溶液洗涤2次，每次约40ml，将洗涤后的正丁醇提取液蒸干，向剩余的残渣中加5ml水使其溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1.5cm，柱高为12cm），先用50ml水洗脱，再用30ml40%的乙醇洗脱，再用80ml70%的乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，剩余的残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。所述待测样品提取物溶液Ⅱ的进样量为10μl。