[发明专利]一种快速测定畜禽粪便中氟喹诺酮类药物的方法

权利要求书

1.一种快速测定畜禽粪便中氟喹诺酮类药物的方法，其特征在于：

1）将冻干的禽畜粪便样品研磨，并过2mm筛后，筛下组份待用；

2）准确称取0.50-1.00g样品置于离心管中，加入50%氯化钙盐酸缓冲液5-10mL，涡旋混合1分钟，超声提取15-30分钟，4500r/min离心10分钟，收集上清液；

3）残渣用上述步骤2）的方法反复提取2-5次，合并上清液；

4）溶液过0.22μm滤膜收集透过滤膜样品待测；

5）首先用高效液相色谱仪器对氟喹诺酮类药物中的一种或二种以上的标准样品分别进行定性分析，确定其保留时间；

6）标准曲线制备：制备系列浓度的氟喹诺酮类药物中的一种或二种以上的混合标准品工作液，标准品工作液中每种标准品的系列浓度分别为10、50、100、500、1000ng/mL，在同上步骤5）相同的色谱条件下进行高效液相色谱测定；

以峰面积为纵坐标，每种氟喹诺酮药物的对应的浓度（ng/mL）为横坐标建立各氟喹诺酮药物化合物标准曲线；

7）在同上步骤5）色谱条件下，对待测样品中的目标物含量进行高效液相色谱测定，根据保留时间确定目标物种类，根据标准曲线确定其含量。

2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：

步骤1）采集的禽畜粪便样品首先需要冻干处理，冻干后的样品避光保存，分析前用研钵研磨，并过2mm筛后进行样品前处理。

3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述氟喹诺酮类药物为诺氟沙星、环丙沙星、洛美沙星和恩诺沙星中的一种或二种以上。

4.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：色谱条件：色谱柱为Kromasil C18（5um，250×4.6mm)，于激发波长280nm、发射波长450nm处进行检测，流动相为甲醇-水(78.5:21.5，V/V)，流速为1.0mL·min^-1，进样量为20μL。

5.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：50%氯化钙盐酸缓冲液：50g氯化钙溶于100mL去离子水，用1mol浓度的盐酸调节pH为3.0，即制备成提取液。