[发明专利]单克隆抗体及其应用、试剂盒、检测银杏叶水溶性蛋白含量的Dot-ELISA方法

权利要求书

1.一种银杏叶水溶性蛋白的单克隆抗体，其特征在于，由保藏号为CGMCC NO：8654的杂交瘤产生。

2.如权利要求1所述的单克隆抗体在制备检测银杏叶水溶性蛋白含量的试剂盒中的应用。

3.一种检测银杏叶水溶性蛋白含量的试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1所述的单克隆抗体。

4.一种检测银杏叶水溶性蛋白含量的Dot-ELISA方法，其特征在于，包括如下步骤：

获得待测样品；

获得银杏叶水溶性全蛋白；

取硝酸纤维素膜，划分出第一阴性对照区、第一阳性对照区和第一检测区，经饱和、第一干燥，获得第二阴性对照区、第二阳性对照区和第二检测区；

以磷酸盐缓冲液、所述银杏叶水溶性全蛋白、所述待测样品作为抗原，取所述磷酸盐缓冲液、所述银杏叶水溶性全蛋白、所述待测样品分别包被于所述第二阴性对照区、所述第二阳性对照区、所述第二检测区，经第二干燥、封闭、洗涤、第三干燥，获得抗原膜片；所述银杏叶水溶性全蛋白的最低包被量为9.75ng；

以权利要求1所述的单克隆抗体作为第一抗体，以酶标记的羊抗鼠IgG作为第二抗体，取所述第一抗体与所述抗原膜片结合，获得第一抗体-抗原膜片；取所述第二抗体与所述第一抗体-抗原膜片结合，显色，终止显色，观察所述检测区是否出现斑点用以检测所述待测样品中银杏叶水溶性蛋白含量；

所述检测区出现斑点，则所述待测样品中银杏叶水溶性蛋白含量大于或等于9.75ng；

所述检测区未出现斑点，则所述待测样品中银杏叶水溶性蛋白含量小于9.75ng。

5.根据权利要求4所述的Dot-ELISA方法，其特征在于，所述抗原的点样量为1μL。

6.根据权利要求4所述的Dot-ELISA方法，其特征在于，所述封闭的时间为1h。

7.根据权利要求4所述的Dot-ELISA方法，其特征在于，所述第一抗体的稀释倍数为1:3200～1:6400。

8.根据权利要求4所述的Dot-ELISA方法，其特征在于，所述第二抗体的稀释倍数为1:5000。

9.根据权利要求4所述的Dot-ELISA方法，其特征在于，所述显色的时间为15min～20min。

10.根据权利要求4所述的Dot-ELISA方法，其特征在于，所述第一干燥为在通风橱中干燥。