[发明专利]利用乳清蛋白肽降低血清胆固醇水平的产品和制备方法

权利要求书

1.利用乳清蛋白肽降低降血清胆固醇水平的产品和制备方法，其特征在于其步骤为：从碱性蛋白酶水解的乳清蛋白水解肽溶液中，利用超滤粗分离、树脂脱盐及多级色谱等分离纯化技术，逐步分级分离出胆固醇胶束溶解度抑制活性较高的降胆固醇肽产品，并采用模拟人体胃肠道试验研究其稳定性，结果表明此肽在体内的稳定性较强。

2.根据权利要求1所述的利用乳清蛋白肽降低降血清胆固醇水平的产品和制备方法，其特征是：所述的乳清蛋白质量浓度是5%，加酶量为每1g乳清蛋白加碱性蛋白酶6000-7000U，水解温度是55 ℃，pH为9.0，水解度为23.18%。

3.根据权利要求1所述的利用乳清蛋白肽降低降血清胆固醇水平的产品和制备方法，其特征是：所述的超滤膜截留分子量为10 kDa，温度为30 ℃，压力为0.15 MPa。

4.根据权利要求1所述的利用乳清蛋白肽降低降血清胆固醇水平的产品和制备方法，其特征是：所述的树脂是大孔吸附树脂DA201-C；脱盐的条件为：静态摇床处理24h，动态洗脱流速为1 BV/h，用70%的乙醇洗脱。

5.根据权利要求1所述的利用乳清蛋白肽降低降血清胆固醇水平的产品和制备方法，其特征是：所述的第一级色谱为凝胶过滤色谱，采用的是?KTA?prime蛋白质纯化系统，填料为具有分子筛作用的SepHadex G-50，洗脱液为去离子水，压力为1.0 MPa，流速为1 mL/min，紫外检测波长为280 nm，经凝胶过滤色谱纯化后，得到的第二个组分峰的胆固醇胶束溶解度抑制率最高为47.67%，经分子量标准曲线计算其分子量在1900~3100 Da范围内。

6.根据权利要求1所述的利用乳清蛋白肽降低降血清胆固醇水平的产品和制备方法，其特征是：所述的第二级色谱是反相高效液相色谱（RP-HPLC），色谱柱：C18色谱柱，流动相：A，0.1%的三氟乙酸水溶液；B，0.09%的三氟乙酸乙腈溶液；梯度洗脱程序，检测波长：215nm；柱温：30℃；进样量：10μL；经反相高效液相色谱纯化后得到的14个组分峰中，第五个洗脱峰的胆固醇胶束溶解度抑制率最高，为58.77%，分子量为2454Da。

7.根据权利要求1所述的利用乳清蛋白肽降低降血清胆固醇水平的产品和制备方法，其特征是：所述的体外模拟胃肠道试验其特征在于：体外模拟人体胃肠道环境两个阶段的消化过程，并分别测定消化前后其胆固醇胶束溶解度抑制活性的变化，来确定其稳定性；结果表明，经过两个阶段的消化过程，产品的胆固醇胶束溶解度抑制率从58.77%下降到53.52%，活性降低不明显，证明了产品的稳定性较好。