[发明专利]一种天然活性药物-多糖靶向复合物的制备及其抗肿瘤的应用

权利要求书

1.一种天然活性药物-多糖靶向复合物，其特征在于该天然活性药物-多糖靶向复合物是通过下列方法制备得到的：将具有抗肿瘤活性的天然活性药物通过化学偶联的方法接枝到多糖的骨架上，与具有靶向传递能力的配体—二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-茴香酰胺(DSPE-PEG-AA)物理混合，形成天然活性药物-多糖靶向复合物。

2.根据权利要求1所述的天然活性药物-多糖靶向复合物，其特征在于：所述的天然活性药物选自萜类物质熊果酸、甘草次酸、齐墩果酸和雷公藤甲素，酚类物质和厚朴酚和姜黄素，黄酮类物质藤黄酸和黄芩素，以及葸醌类物质大黄酸和白藜芦醇；所述的多糖选自低分子量肝素、脱硫酸化肝素、未分级肝素、透明质酸、海藻酸、软骨素、多硫酸化软骨素、羧甲基壳聚糖、羧乙基壳聚糖、季铵化羧甲基壳聚糖、N-辛基-O，N-羧甲基壳聚糖、羧甲基葡聚糖或羧甲基香菇多糖。

3.根据权利要求1所述的天然活性药物-多糖靶向复合物，其特征在于该天然活性药物-多糖靶向复合物的制备包括如下步骤：

(1)天然活性药物的结构中含有羧基的

①工艺I：天然活性药物溶于适当的有机溶剂，以二环己基碳二亚胺和羟基琥珀酰亚胺为活化剂，控制反应1条件至反应完全，抽滤，滤液用适当溶剂1沉淀，抽滤得沉淀物，真空干燥，得天然活性药物的活性中间酯；将天然活性药物的中间酯与二胺类连接臂按适当摩尔比例溶于N，N-二甲基甲酰胺中，将二胺类连接臂缓慢滴加到天然活性药物的活性中间酯的溶液中，控制反应2至完全，用适当溶剂2沉淀，沉淀物分别进行酸洗，水洗，抽滤得沉淀物，真空干燥，得氨基化的天然活性药物；

工艺II：A.部分萜类物质用二氯甲烷溶解，一定温度下逐步滴入溶解有氧化剂的溶液中，室温搅拌一定时间。反应液经过滤，洗涤，水洗，干燥，过滤，浓缩后，硅胶柱层析洗脱，浓缩，得固体；

B.将反应A得到的白色固体和盐酸羟胺溶解于吡啶中，一定温度下回流一定时间。待反应液冷却至室温后，蒸馏水洗涤，过滤，水洗，干燥，得固体；

C.将反应B得到的固体与氰基硼氢化钠和乙酸钠，溶解于甲醇中，氮气保护下反应。冰浴条件下，缓慢滴加三氯化钛溶液，室温搅拌一定时间。将所得的浑浊液，加入适量的蒸馏水，旋去甲醇，调节溶液pH至中性，用二氯甲烷萃取，有机层水洗，干燥，过滤，滤液浓缩，用甲醇、二氯甲烷和石油醚的混合溶剂重结晶，得固体，即氨基化的天然活性药物；

②将多糖分子溶于反应溶剂，在氮气保护下，以1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺为活化剂，加入氨基化的天然活性药物，控制反应至反应完全，反应结束后，用适当溶剂沉淀，过滤得到沉淀物，复溶，超声，透析，冷冻干燥，即得天然活性药物-多糖偶联物；

③工艺I：将天然活性药物-多糖偶联物与水按重量比为1～50∶1000的比例溶解，DSPE-PEG-AA与水按重量比为1～50∶1000的比例溶解，将DSPE-PEG-AA溶液缓慢滴加入天然活性药物-多糖偶联物溶液中，室温搅拌反应一定时间，得到天然活性药物-多糖靶向复合物；

工艺II：将天然活性药物-多糖偶联物与DSPE-PEG-AA按1∶50～50∶1比例混合，用蒸馏水溶解，室温搅拌一定时间，得到天然活性药物-多糖靶向复合物；

(2)天然活性药物的结构中不含有羧基的

①将多糖溶于反应溶剂中，以4-二甲氨基吡啶为催化剂，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺为脱水剂，在氮气保护下，将天然多糖上的羧基活化；将天然活性药物溶于适当的溶剂，缓慢滴加到多糖溶液中，控制反应至完全，待反应结束，用适当溶剂沉淀，过滤得沉淀物，复溶，超声，透析，冷冻干燥，即得天然活性药物-多糖偶联物；

②工艺I：将天然活性药物-多糖两亲性偶联物与水按重量比为3～50∶1000的比例溶解，DSPE-PEG-AA与水按重量比为1～50∶1000的比例溶解，将DSPE-PEG-AA溶液滴缓慢滴加入天然活性药物-天然多糖两亲性偶联物溶液中，室温搅拌反应一定时间，得到天然活性药物-多糖靶向复合物；

工艺II：将天然活性药物-多糖偶联物与DSPE-PEG-AA按1∶50～50∶1比例混合，用蒸馏水溶解，室温搅拌一定时间，得到天然活性药物-多糖靶向复合物。