[发明专利]一种转基因材料来源食用油的分子检测方法有效

专利信息
申请号: 201310743412.X 申请日: 2013-12-30
公开(公告)号: CN103642935A 公开(公告)日: 2014-03-19
发明(设计)人: 皮妍;段昱竹;蒋科技;乔晓京;卢大儒;乔守怡 申请(专利权)人: 复旦大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 上海正旦专利代理有限公司 31200 代理人: 陆飞;盛志范
地址: 200433 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 转基因 材料 来源 食用油 分子 检测 方法
【权利要求书】:

1.一种转基因材料来源食用油的分子检测方法,其特征在于具体步骤为:

(1)用CTAB植物基因组DNA快速提取试剂盒提取食用油中的DNA;

(2)设计并筛选得到扩增tRNA基因的一个引物以及扩增18S基因的三个不同扩增长度的引物,分别为:

tRNA:  SEQ.ID.NO1

SEQ.ID.NO2

18S-1: SEQ.ID.NO3

 SEQ.ID.NO4

18S-2: SEQ.ID.NO5

SEQ.ID.NO6

18S-3: SEQ.ID.NO7

SEQ.ID.NO8

(3)设计35S启动子引物:

35S:   SEQ.ID.NO9   

SEQ.ID.NO10

(4) 从DNA提取后,所有实验均设阳性对照和空白对照;

(5)用步骤(2)和步骤(3)中的引物PCR扩增步骤(1)从食用油中提取到的模板DNA;

(6)将上述PCR扩增产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳分离,EB染色后鉴定是否存在扩增产物,并依此判断该食用油的原料是否为转基因或含转基因成分:

若存在18S的扩增产物,则确定提取出了食用油中的DNA;

若同时存在内源基因18S和外源基因35S的产物,则该食用油的原料为转基因或含转基因成分;

若存在内源基因18S而不存在外源基因35S产物,则该食用油的原料为非转基因。

2.根据权利要求1所述的转基因材料来源食用油的分子检测方法,其特征在于,所述食用油经过加热处理。

3.根据权利要求1所述的转基因材料来源食用油的分子检测方法,其特征在于,所述用CTAB植物基因组DNA快速提取试剂盒提取食用油中DNA的步骤为:将食用油中的核酸富集到CTAB裂解液中,通过试剂盒操作纯化裂解液中的DNA,并将DNA储存在洗脱缓冲液EB中,存放在2-8℃。

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