[发明专利]一种转基因材料来源食用油的分子检测方法有效
申请号: | 201310743412.X | 申请日: | 2013-12-30 |
公开(公告)号: | CN103642935A | 公开(公告)日: | 2014-03-19 |
发明(设计)人: | 皮妍;段昱竹;蒋科技;乔晓京;卢大儒;乔守怡 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人: | 陆飞;盛志范 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 转基因 材料 来源 食用油 分子 检测 方法 | ||
1.一种转基因材料来源食用油的分子检测方法,其特征在于具体步骤为:
(1)用CTAB植物基因组DNA快速提取试剂盒提取食用油中的DNA;
(2)设计并筛选得到扩增tRNA基因的一个引物以及扩增18S基因的三个不同扩增长度的引物,分别为:
tRNA: SEQ.ID.NO1
SEQ.ID.NO2
18S-1: SEQ.ID.NO3
SEQ.ID.NO4
18S-2: SEQ.ID.NO5
SEQ.ID.NO6
18S-3: SEQ.ID.NO7
SEQ.ID.NO8
(3)设计35S启动子引物:
35S: SEQ.ID.NO9
SEQ.ID.NO10
(4) 从DNA提取后,所有实验均设阳性对照和空白对照;
(5)用步骤(2)和步骤(3)中的引物PCR扩增步骤(1)从食用油中提取到的模板DNA;
(6)将上述PCR扩增产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳分离,EB染色后鉴定是否存在扩增产物,并依此判断该食用油的原料是否为转基因或含转基因成分:
若存在18S的扩增产物,则确定提取出了食用油中的DNA;
若同时存在内源基因18S和外源基因35S的产物,则该食用油的原料为转基因或含转基因成分;
若存在内源基因18S而不存在外源基因35S产物,则该食用油的原料为非转基因。
2.根据权利要求1所述的转基因材料来源食用油的分子检测方法,其特征在于,所述食用油经过加热处理。
3.根据权利要求1所述的转基因材料来源食用油的分子检测方法,其特征在于,所述用CTAB植物基因组DNA快速提取试剂盒提取食用油中DNA的步骤为:将食用油中的核酸富集到CTAB裂解液中,通过试剂盒操作纯化裂解液中的DNA,并将DNA储存在洗脱缓冲液EB中,存放在2-8℃。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于复旦大学,未经复旦大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201310743412.X/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇:一种有机硅自洁透明罩光漆
- 下一篇:一种棚架搭设装置