[发明专利]犬瘟热病毒、犬腺病毒Ⅱ型和犬副流感病毒的多重PCR检测引物组有效
申请号: | 201310746340.4 | 申请日: | 2013-12-30 |
公开(公告)号: | CN103740862A | 公开(公告)日: | 2014-04-23 |
发明(设计)人: | 耿庆华;林颖;王芳;付海滨;胡姝 | 申请(专利权)人: | 中华人民共和国沈阳出入境检验检疫局 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
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地址: | 110000 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 犬瘟热 病毒 流感病毒 多重 pcr 检测 引物 | ||
1.一种犬瘟热病毒、犬腺病毒Ⅱ型和犬副流感病毒的多重PCR检测引物组,其特征在于:所述引物组包括引物对A、引物对B和引物对C;
所述引物对A包括引物1和引物2;
所述引物对B包括引物3和引物4;
所述引物对C包括引物5和引物6;
所述引物1、引物2、引物3、引物4、引物5和引物6的核苷酸序列分别为序列表中的序列1、序列2、序列3、序列4、序列5和序列6。
2.按照权利要求1所述犬瘟热病毒、犬腺病毒Ⅱ型和犬副流感病毒的多重PCR检测引物组,其特征在于:所述引物组由引物对A、引物对B和引物对C组成;
所述引物对A由引物1和引物2组成;
所述引物对B由引物3和引物4组成;
所述引物对C由引物5和引物6组成。
3.按照权利要求2所述犬瘟热病毒、犬腺病毒Ⅱ型和犬副流感病毒的多重PCR检测引物组,其特征在于:所述引物对A、引物对B和引物对C的摩尔比为1:1:1。
4.一种犬瘟热病毒、犬腺病毒Ⅱ型和犬副流感病毒的多重PCR检测试剂,其特征在于:所述试剂由权利要求1或2中所述的引物组、PCR缓冲液、dNTP、DNA聚合酶和水组成;
所述引物组中引物对A中各引物在所述PCR检测试剂中的终浓度各为0.002~0.008μM,所述引物组中引物对B中各引物在所述PCR检测试剂中的终浓度各为0.002~0.008μM,所述引物组中引物对C中各引物在所述PCR检测试剂中的终浓度各为0.002~0.008μM;
所述dNTP在所述PCR检测试剂中的终浓度为8~16μM;
所述DNA聚合酶在所述PCR检测试剂中的终浓度为0.05~0.2U/μL。
5.按照权利要求4所述犬瘟热病毒、犬腺病毒Ⅱ型和犬副流感病毒的多重PCR检测试剂,其特征在于:
所述引物组中引物对A中各引物在所述PCR检测试剂中的终浓度各为0.004μM,所述引物组中引物对B中各引物在所述PCR检测试剂中的终浓度各为0.004μM,所述引物组中引物对C中各引物在所述PCR检测试剂中的终浓度各为0.004μM;
所述dNTP在所述PCR检测试剂中的终浓度为10μM;
所述DNA聚合酶在所述PCR检测试剂中的终浓度为0.1U/μL。
6.按照权利要求4所述犬瘟热病毒、犬腺病毒Ⅱ型和犬副流感病毒的多重PCR检测试剂,其特征在于:
所述引物组中引物对A中各引物在所述PCR检测试剂中的终浓度各为0.008μM,所述引物组中引物对B中各引物在所述PCR检测试剂中的终浓度各为0.008μM,所述引物组中引物对C中各引物在所述PCR检测试剂中的终浓度各为0.008μM;
所述dNTP在所述PCR检测试剂中的终浓度为10μM;
所述DNA聚合酶在所述PCR检测试剂中的终浓度为0.1U/μL。
7.一种犬瘟热病毒、犬腺病毒Ⅱ型和犬副流感病毒的多重PCR检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒为含有权利要求1~3任一所述的PCR引物组或权利要求4~6所述的PCR检测试剂的试剂盒。
8.一种权利要求1~3任一所述的PCR引物组或权利要求4~6所述的PCR检测试剂或权利要求7所述PCR检测试剂盒在制备检测和/或辅助检测待测样品中是否含有犬瘟热病毒、犬腺病毒Ⅱ型和犬副流感病毒产品中的应用。
9.按照权利要求8所述的应用,其特征在于:在制备检测和/或辅助检测待测样品中是否含有犬瘟热病毒、犬腺病毒Ⅱ型和犬副流感病毒为用权利要1~3任一所述的PCR引物组或权利要求4~6所述的PCR检测试剂或权利要求7所述PCR检测试剂盒对所述待检测样品进行三重PCR扩增。
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