[发明专利]一种毛细管电泳拆分2-甲基-4-氯戊氧基丙酸对映体的方法

说明书

（一）技术领域

本发明涉及一种手性除草剂2-甲基-4-氯戊氧基丙酸的对映体拆分方法，属于环境污染物分析技术领域。

（二）背景技术

除草剂是一类用来杀死植物的药剂。这些药剂能够选择性地作用于特定目标，使其他对于人类有用的农作物不受伤害，或受的伤害较小。据统计，我国目前除草剂每年使用面积以200万hm²递增。如此大量化学除草剂的使用，一方面，它对我们农业发展作出了非常重要的贡献，但同时也造成了一系列的环境问题，如抗药杂草种群的增加、土壤板结、水体污染等，严重地影响了农业的可持续发展和人类的健康安全。

2-甲基-4-氯戊氧基丙酸，是一种主要针对阔叶类的手性除草剂。英文名称为2-(4-Chloro-2-methylphenoxy)propanoic acid，分子式C₁₀H₁₁ClO₃，分子量214.65，在水中溶解度为0.734g/L。大鼠半数致死量（经口）650mg/kg，小鼠半数致死量（经口）369mg/kg。

已有研究表明，同一手性除草剂的各对映体之间虽然有着相同的理化性质，但是它们在生理和毒理方面存在着巨大的差异，因此，从对映体层面考虑这些手性除草剂的药效和环境安全性就显得尤为重要，而手性除草剂2-甲基-4-氯戊氧基丙酸的拆分则是研究其对映体环境行为差异和环境安全的必要前提，它将对于准确评价2-甲基-4-氯戊氧基丙酸在环境和农产品的残留有着十分重要的意义。

（三）发明内容

本发明要解决的技术问题在于提供一种毛细管电泳结合紫外检测技术拆分2-甲基-4-氯戊氧基丙酸的方法，为评价其各对映体的残留特征和环境健康风险提供技术支持。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种拆分2-甲基-4-氯戊氧基丙酸的方法，包括以下步骤：

(1)将外消旋的2-甲基-4-氯戊氧基丙酸用乙腈助溶后与水溶剂混合制成样品溶液，所述的样品溶液中2-甲基-4-氯戊氧基丙酸的浓度为10^-2mg/mL～10^-1mg/mL；

(2)配制十二烷基硫酸钠-磷酸水溶液，使H₃PO₄浓度和十二烷基硫酸钠（SDS）浓度均在55～70mmol/L，调节溶液pH至1.5～2.5；随后加入手性选择剂γ-环糊精（γ-CD）使其质量浓度为2.5-3.5%，再添加异丙醇使其体积浓度为3～5%，得到含有γ-CD和异丙醇的十二烷基硫酸钠-磷酸缓冲溶液，作为运行用的缓冲溶液；

(3)将步骤(1)制得的样品溶液和步骤(2)制得的含有γ-环糊精和异丙醇的十二烷基硫酸钠-磷酸缓冲溶液放入毛细管电泳仪中，加上反向电压，进行拆分。

本发明步骤(1)中，由于2-甲基-4-氯戊氧基丙酸不溶于水，因此需加入少量的助溶剂乙腈助溶。

本发明步骤(2)中，配置H₃PO₄浓度和十二烷基硫酸钠（SDS）浓度都在55～70mmol/L的缓冲溶液，优选缓冲溶液中十二烷基硫酸钠与磷酸的浓度分别为60mmol/L和60mmol/L。本发明采用碱液如饱和氢氧化钠溶液调节缓冲溶液的pH值，优选调节缓冲溶液的pH至2.5左右。本发明优选含有γ-CD和异丙醇的十二烷基硫酸钠-磷酸缓冲溶液中γ-环糊精的质量终浓度为2.85%。所述缓冲溶液中加入了有机改性剂异丙醇，异丙醇的体积浓度优选5%。

进一步，所述步骤(2)中的含有γ-环糊精和异丙醇的十二烷基硫酸钠-磷酸缓冲溶液优选按照如下方法配制：

配制十二烷基硫酸钠-磷酸水溶液，使H₃PO₄浓度和十二烷基硫酸钠浓度均为60mmol/L，并用饱和氢氧化钠溶液调节溶液pH至2.5；随后加入手性选择剂γ-环糊精使其质量浓度为2.85%，再添加异丙醇使其体积浓度为5%，得到含有γ-环糊精和异丙醇的十二烷基硫酸钠-磷酸缓冲溶液。

本发明运行用的缓冲溶液在配制好后使用一次性注射器经过0.45μm的滤膜过滤。