[发明专利]能提高多杀菌素产量的基因工程菌及构建方法及应用有效
| 申请号： | 201310756049.5 | 申请日： | 2013-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN103740631A | 公开（公告）日： | 2014-04-23 |
| 发明（设计）人： | 卢文玉;薛超友;张香梅 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/76;C12P19/62;C12R1/01 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 陆艺 |
| 地址： | 300072*** | 国省代码： | 天津;12 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 提高 杀菌 产量 基因工程 构建 方法 应用 | ||
1.一种能提高多杀菌素产量的基因工程菌的构建方法，其特征是包括如下步骤：
①将spnK表达盒插入大肠杆菌-刺糖多孢菌穿梭质粒pOJ260，构建重组质粒pLU101；
②将重组质粒pLU101导入刺糖多孢菌（Saccharopolyspora spinosa）ATCC49460中，重组质粒通过同源重组整合至基因组，得到能提高多杀菌素产量的基因工程菌，命名为LU101；
所述spnK表达盒由ermE*启动子、spnK编码基因和spnK终止子组成；
所述ermE*启动子的序列是SEQ ID NO.23所示；spnK编码基因的序列是SEQ ID NO.13所示。
2.权利要求1所述的构建方法构建的能提高多杀菌素产量的基因工程菌LU101。
3.一种能提高多杀菌素产量的基因工程菌的构建方法，其特征是包括如下步骤：
①将spnK表达盒插入大肠杆菌-刺糖多孢菌穿梭质粒pOJ260，构建重组质粒pLU101；
②将spnN表达盒、spnO表达盒、spnP表达盒、spnQ表达盒、spnR表达盒和spnS表达盒，通过粘性末端酶切连接方法插入重组质粒pLU101，构建重组质粒pLU102；
③将所述重组质粒pLU102导入刺糖多孢菌（Saccharopolyspora spinosa）ATCC49460中，重组质粒通过同源重组整合至基因组，得到能提高多杀菌素产量的基因工程菌，命名为LU102；
所述spnK表达盒由ermE*启动子、spnK编码基因和spnK终止子组成；
所述spnN表达盒由spnN启动子、spnN编码基因、spnN终止子组成；
所述spnO表达盒由spnO启动子、spnO编码基因、spnO终止子组成；
所述spnP表达盒由spnP启动子、spnP编码基因、spnP终止子组成；
所述spnQ表达盒由spnQ启动子、spnQ编码基因、spnQ终止子组成；
所述spnR表达盒由spnR启动子、spnR编码基因、spnR终止子组成；
所述spnS表达盒由spnS启动子、spnS编码基因、spnS终止子组成。
所述ermE*启动子的序列是SEQ ID NO.23所示；
所述spnK编码基因的序列是SEQ ID NO.13所示；
所述spnN编码基因的序列是SEQ ID NO.14所示；
所述spnO编码基因的序列是SEQ ID NO.15所示；
所述spnP编码基因的序列是SEQ ID NO.16所示；
所述spnQ编码基因的序列是SEQ ID NO.17所示；
所述spnR编码基因的序列是SEQ ID NO.18所示；
所述spnS编码基因的序列是SEQ ID NO.19所示。
4.权利要求3所述的构建方法构建的能提高多杀菌素产量的基因工程菌LU102。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于天津大学，未经天津大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201310756049.5/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
