[发明专利]表达方法

权利要求书

1.通过短小芽胞杆菌生产蛋白质的方法，包括下列方法步骤

(a)在短小芽胞杆菌中引入包含启动子和编码蛋白质的核酸的表达构建体；

(b)蛋白质在短小芽胞杆菌中表达；

其中所述短小芽胞杆菌是孢子形成抑制的，其是修饰基因spoIV的结果,

其中所述启动子包含选自下列的核酸序列

(a)SEQ ID No.1所示的核酸序列；

(b)SEQ ID No.2所示的核酸序列；

(c)SEQ ID No.3所示的核酸序列；

(d)SEQ ID No.4所示的核酸序列。

2.根据权利要求1的方法，其中所述短小芽胞杆菌是孢子形成抑制的，其是缺失基因spoIV或其部分的结果。

3.根据权利要求1或2的方法，其特征在于所述蛋白质是被分泌的蛋白质。

4.根据权利要求1或2的方法，其中所述蛋白质并非自然存在于该短小芽胞杆菌中。

5.根据权利要求1或2的方法，其中所述蛋白质是酶。

6.根据权利要求5的方法，其中所述酶是淀粉酶、β-葡糖苷酶、β-甘露糖苷酶、卡拉胶酶、糖酶、纤维素酶、酯酶、葡糖苷酶、漆酶、脂肪酶、核酸酶、氧化还原酶、果胶酶、过水解酶、植酸酶、聚半乳糖醛酸酶、蛋白酶、鼠李半乳糖醛酸酶、鞣酸酶、转移酶、黄原胶酶、或其混合物。

7.根据权利要求6的方法，其中所述淀粉酶选自葡糖淀粉酶、G4淀粉酶或生麦芽糖淀粉酶。

8.根据权利要求6的方法，其中所述纤维素酶选自酸性纤维素酶或半纤维素酶。

9.根据权利要求6的方法，其中所述酯酶为果胶酯酶。

10.根据权利要求6的方法，其中所述蛋白酶选自蛋白水解酶、内肽酶、外肽酶或中性蛋白酶。

11.根据权利要求6的方法，其中所述蛋白酶选自氨肽酶、枯草杆菌蛋白酶或凝乳酶。

12.根据权利要求6的方法，其中所述蛋白酶为粗制凝乳酶。

13.根据权利要求6的方法，其中所述糖酶选自阿聚糖酶、β-葡聚糖酶、甘露聚糖酶、戊聚糖酶或木聚糖酶。

14.根据权利要求13的方法，其中所述β-葡聚糖酶选自内切-1,3-β-葡聚糖酶或内切-1,3(4)-β-葡聚糖酶。

15.根据权利要求6的方法，其中所述糖酶选自内切-1,4-β-木聚糖酶或木葡聚糖酶。

16.根据权利要求6的方法，其中所述脂肪酶选自糖脂酶和磷脂酶。

17.根据权利要求16的方法，其中所述磷脂酶为溶血磷脂酶。

18.根据权利要求6的方法，其中所述果胶酶选自果胶酸裂合酶或果胶酯酶。

19.根据权利要求6的方法，其中所述氧化还原酶选自氧化酶、α-乙酰脱羧酶或过氧化氢酶。

20.根据权利要求19的方法，其中所述氧化酶选自葡萄糖氧化酶或纤维二糖氧化酶。

21.根据权利要求6的方法，其中所述转移酶为转谷氨酰胺酶。

22.根据权利要求5的方法，其中所述酶是α-淀粉酶和/或蛋白酶。