[发明专利]发酵方法

权利要求书

1.发酵方法，其包括以下步骤：

a) 提供博德特氏菌属物种细菌的样品；

b) 在第一环境中在至少一种bvg(博德特氏菌毒力基因)调节条件下将所述博德特氏菌属物种细菌的样品孵育至少5代，从而产生成熟培养物；

c) 在第二环境中在至少一种bvg调节条件不存在的情况下孵育所述成熟培养物；

其中步骤c)在步骤b)之后发生。

2.权利要求1的发酵方法，其中所述bvg调节条件包括在以下温度下孵育所述样品

(i) 低于或等于28℃、低于或等于27℃、低于或等于26℃、或低于或等于25℃；

(ii) 高于或等于18℃、高于或等于20℃、高于或等于22℃、或高于或等于24℃；或

(iii) 0℃至28℃、0℃至27℃、0℃至26℃或0℃至25℃。

3.权利要求1-2中任一项的发酵方法，其中所述bvg调节条件包括在以下氧浓度下孵育所述样品

(i) 低于或等于0.100、低于或等于0.090、低于或等于0.080、或低于或等于0.070 mmol溶解O₂ /升；

(ii) 高于或等于0.001、高于或等于0.050、高于或等于0.010、高于或等于0.015、高于或等于0.020、或高于或等于0.025 mmol溶解O₂ /升；或

(iii) 0.010至0.100、0.010至0.090、0.010至0.080或0.010至0.070 mmol溶解O₂ /升。

4.权利要求1-3中任一项的发酵方法，其中所述bvg调节条件包括在碱性pH孵育所述样品。

5.权利要求4的发酵方法，其中所述碱性pH是以下pH

(i) 大于或等于7.2、大于或等于7.3、大于或等于7.4；

(ii)小于或等于9.5、小于或等于9.0、小于或等于8.5或小于或等于8.0；或

(iii) 7.2至8.0、7.3至8.0或7.4至8.0。

6.权利要求1-5中任一项的发酵方法，其中所述bvg调节条件包括在酸性pH孵育所述样品。

7.权利要求6的发酵方法，其中所述酸性pH是以下pH

(i) 小于或等于7.0、小于或等于6.8、小于或等于6.6、小于或等于6.4或小于或等于6.2；

(ii) 高于或等于4.5、高于或等于5.0、高于或等于5.5、高于或等于6.0或高于或等于6.5；或

(iii) 5.0至7.0、5.0至6.9或5.0至6.8。

8.任何前述权利要求的发酵方法，其中所述第一环境是第一培养基。

9.任何前述权利要求的发酵方法，其中所述第二环境是第二培养基。

10.权利要求8的发酵方法，其中所述至少一种bvg调节条件包括在所述第一培养基中的至少一种bvg调节剂的存在。

11.发酵方法，其包括以下步骤：

a) 在包含至少一种bvg调节剂的第一培养基中提供博德特氏菌属物种细菌的样品；

b) 在所述包含至少一种bvg调节剂的第一培养基中将所述样品孵育至少5代，从而产生成熟培养物；

c) 在第二培养基中在至少一种bvg调节剂不存在的情况下孵育所述成熟培养物；

其中步骤c)在步骤b)之后发生。

12.发酵方法，其包括以下步骤：

a) 在第一培养基中提供博德特氏菌属物种细菌的样品；

b) 在包含至少一种bvg调节剂的第一培养基中将所述样品孵育至少5代，从而产生成熟培养物；

c) 在第二培养基中在至少一种bvg调节剂不存在的情况下孵育所述成熟培养物；

其中步骤c)在步骤b)之后发生。

13.前述权利要求中任一项的发酵方法，其中所述博德特氏菌属物种是选自百日咳博德特氏菌(Bordetella pertussis)、副百日咳博德特氏菌(Bordetella parapertussis)和支气管炎博德特氏菌(Bordetella bronchiseptica)的物种。