[发明专利]核酸内切酶

权利要求书

1.一种核酸内切酶I，其中所述核酸内切酶I为SEQ ID No.4的序列，并且其中FYCGC五肽基序紧N末端的氨基酸残基已由谷氨酸置换。

2.根据权利要求1所述的核酸内切酶I，所述核酸内切酶I源自杀鲑弧菌。

3.根据权利要求1所述的核酸内切酶I，当在0.5mM TCEP的存在下在50℃下温育30分钟时，所述核酸内切酶I是基本上失活的，并且残留活性在0.5mM TCEP的存在下进行评估。

4.根据权利要求1所述的核酸内切酶I，在0.5M氯化钠的浓度下，所述核酸内切酶I具有的催化活性不小于60％的在其最佳盐浓度下由所述核酸内切酶I显示出的催化活性。

5.一种从样品中去除污染多核苷酸的方法，所述方法包括使所述样品与根据权利要求1～4中任一项所述的核酸内切酶I接触。

6.根据权利要求5所述的方法，其中在允许消化其中的任何多核苷酸的条件下，使所述样品与所述核酸内切酶I接触，并且随后使所述样品和核酸内切酶混合物与失活添加剂在足以使所述核酸内切酶失活的温度和时间下接触。

7.根据权利要求5或权利要求6所述的方法，其中所述样品是含有重组产生的目的蛋白质的制剂。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述蛋白质是酶。

9.根据权利要求5或权利要求6所述的方法，其中所述样品含有目的分析物蛋白质。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述样品源自细胞裂解产物、组织样品或体液。

11.根据权利要求5或权利要求6所述的方法，其中所述样品包含抗体或抗体片段。

12.根据权利要求5或权利要求6所述的方法，其中所述样品包含DNA结合蛋白或与溶液中的核酸结合的蛋白质。

13.根据权利要求5或权利要求6所述的方法，其中所述样品是可用于多核苷酸分析技术中的试剂溶液。

14.根据权利要求13所述的方法，所述多核苷酸分析技术是PCR或DNA/RNA测序。

15.根据权利要求6所述的方法，其中所述失活添加剂是金属离子螯合剂或二硫键还原剂。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述试剂选自乙二胺四乙酸(EDTA)、二硫苏糖醇(DTT)、2-巯基乙醇、2-巯基乙胺·HCl、TCEP(三(2-羧乙基)膦)和N-乙基马来酰亚胺。

17.一种核酸分子，所述核酸分子编码根据权利要求1～4中任一项所述的核酸内切酶I。

18.一种用于分离和纯化根据权利要求1～4中任一项所述的核酸内切酶I的方法，所述方法包括在合适的宿主细胞中表达所述核酸内切酶，并且随后从所述宿主细胞和/或所述细胞已在其中进行培养的培养基中分离所述核酸内切酶。

19.一种组合物，所述组合物包含根据权利要求1-4中任一项所述的核酸内切酶I和第二核酸内切酶I。

20.根据权利要求19所述的组合物，其中所述第二核酸内切酶I为SEQ ID No.5的序列。

21.根据权利要求20所述的组合物，其中所述第二核酸内切酶I来自霍乱弧菌。