[发明专利]赋予针对RAF抑制剂的抗性的C-RAF突变体

权利要求书

1.一种编码具有C-RAF活性的突变体C-RAF多肽的分离的核酸分子，其中所述突变体C-RAF多肽与包含SEQ.ID.NO.2的野生型C-RAF多肽相比包含至少一个氨基酸取代，所述至少一个氨基酸取代赋予表达所述突变体C-RAF多肽的细胞针对一种或多种RAF抑制剂的抗性。

2.根据权利要求1所述的分离的核酸分子，其中所述至少一个氨基酸取代发生于一个或多个氨基酸位置，所述位置选自：104E、257S、261P、356G、361G、427S、447D、469M、478E和554R。

3.根据权利要求1所述的分离的核酸分子，其中所述至少一个取代选自：104E>K、257S>P、261P>T、356G>E、361G>A、427S>T、447D>N、469M>I、478E>K和554R>K。

4.根据权利要求1所述的分离的核酸分子，其中所述至少一个取代选自：257S、261P和361G。

5.根据权利要求1-4任一项所述的分离的核酸分子，其中所述RAF抑制剂选自：RAF265、索拉非尼、SB590885、PLX 4720、PLX4032、GDC-0879、ZM 336372和(S)-甲基1-(4-(3-(5-氯-2-氟-3-(甲基磺酰氨基)苯基)-1-异丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-基氨基甲酸酯。

6.根据权利要求1-4任一项所述的分离的核酸分子，其中所述RAF抑制剂是PLX4032。

7.包含权利要求1所述的核酸的表达载体。

8.包含权利要求7所述的表达载体的宿主细胞。

9.一种具有C-RAF活性的分离的突变体C-RAF多肽，其中所述突变体C-RAF多肽与包含SEQ.ID.NO.2的野生型C-RAF多肽相比包含至少一个氨基酸取代，所述至少一个氨基酸取代赋予表达所述突变体C-RAF多肽的细胞针对一种或多种RAF抑制剂的抗性。

10.根据权利要求9所述的突变体C-RAF多肽，其中所述至少一个氨基酸取代发生于一个或多个氨基酸位置，所述位置选自：104E、257S、261P、356G、361G、427S、447D、469M、478E和554R。

11.根据权利要求9所述的突变体C-RAF多肽，其中所述至少一个取代选自：104E>K、257S>P、261P>T、356G>E、361G>A、427S>T、447D>N、469M>I、478E>K和554R>K。

12.根据权利要求9所述的突变体C-RAF多肽，其中所述至少一个取代选自：257S、261P和361G。

13.根据权利要求9-12任一项所述的突变体C-RAF多肽，其中所述RAF抑制剂选自以下组：RAF265、索拉非尼、SB590885、PLX4720、PLX4032、GDC-0879、ZM 336372和(S)-甲基1-(4-(3-(5-氯-2-氟-3-(甲基磺酰氨基)苯基)-1-异丙基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2-基氨基)丙-2-基氨基甲酸酯。

14.根据权利要求9-12任一项所述的突变体C-RAF多肽，其中所述RAF抑制剂是PLX4032。

15.一种特异性结合权利要求9的多肽的抗体制剂。

16.一种治疗患有癌症的受试者的方法，所述方法包括：

(a)从患者的癌症细胞提取核酸；

(b)测定编码C-RAF多肽的至少一部分核酸分子的编码C-RAF多肽的核酸分子中一个或多个突变的存在，所述突变在以下一个或多个位置与野生型C-RAF多肽相比改变所编码的C-RAF多肽的一个或多个氨基酸处氨基酸残基的身份，所述位置选自：104E、257S、261P、356G、361G、427S、447D、469M、478E和554R；以及

(c)当所述核酸分子包含与野生型C-RAF多肽相比在所述编码的C-RAF多肽的一个或多个氨基酸处改变所述氨基酸残基的核苷酸时，给予所述受试者有效量的RAF抑制剂和有效量的第二抑制剂。