[发明专利]热敏纳米颗粒制剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种热敏脂质体制剂，更特别地涉及一种包含磷脂和表面活性剂的脂质体制剂，其中所述脂质体支持在低于或等于约8℃的温度下长期储存，控制降解物形成以最大化产品效价，并且在温和的体温过高(hyperthermic)温度下释放其包含物。还描述了制备制剂的方法。

背景技术

脂质体是由至少一个包封水性内部隔室的脂质双层膜组成。脂质体可以通过膜类型和尺寸表征。小单层囊泡(SUV)具有单层膜且直径通常介于0.02至0.25μm之间；大单层囊泡(LUV)通常大于0.25μm。寡层大囊泡(oligolamellar large vesicle)和多层大囊泡具有多个、通常同心的膜层，并且通常大于0.25μm。具有几个非同心膜的脂质体，即包含在较大囊泡内的几个小囊泡，称为多囊囊泡。

脂质体可以配制成载有治疗剂、药物或其它活性剂，所述治疗剂、药物或其它活性剂包含在水性内部空间(水溶性活性剂)或分布在脂质双层内(水不溶性活性剂)。脂质体也可以结合允许活性剂递送到特定目标位置的抗体或靶分子。将药物包囊在脂质体中(1)降低了药物的毒性，(2)避免了身体的防御，所述防御通常识别外源颗粒并且将它们作为靶标通过肝和脾的网状内皮系统(RES)除去，和(3)使该药物载体靶向于作用的治疗位置，并且一旦到达该位置，快速释放药物以便其可以作用于靶组织。进一步，可以通过将聚乙二醇脂质引入到脂质体膜而抑制脂质体被网状内皮系统(RES)的细胞从血液清除；这些脂质抑制标识供RES摄取的脂质体的蛋白质吸附。

脂质体可以设计为不渗漏的，但是如果该脂质体膜中出现小孔，或者如果该膜变成液体(例如，发生从固相或凝胶相到液相的相变)，或者如果该膜降解或溶解，则变成可渗漏的。这样的渗透性分解可以通过施加电场(电穿孔)或将脂质体暴露于酶或表面活性剂而诱发。另一种方法包括使膜的温度升高至其由凝胶向液相转化温度附近的温度，此时似乎在部分液体和部分固体膜中的相边界区域的孔缺陷能增加水、离子和小分子的跨膜转运。临床上体温升高称为体温过高(Hyperthermia)。该过程用于升高受试者的目标部位的温度，并且如果热敏脂质体可以递送到该目标部位，则该温度升高可以触发脂质体内含物的释放，引起治疗剂在目标部位的选择性递送和释放，如Yatvin等人,Science 204:188(1979)最初描述的。然而，该技术受到其中脂质体的相变温度高于(大于37℃)正常组织温度的条件的限制。

体温过高引起多种生物学变化。综述参考Issels RD.Hyperthermia adds to Chemotherapy,European J of Cancer(2008)44:2546-2554。温和的体温过高范围(39-44℃)内的温度调节局部的生理变化，比如血流量、血管系统渗透性和组织氧合作用增加。支持实体瘤的血管系统的结构混乱，且内衬微血管系统的内皮细胞没有密封在一起，通常导致多孔性(porous quality)。体温过高引起异常肿瘤微血管系统中的孔径增加，因此增强纳米尺寸分子(比如直径约100nm的脂质体)外渗到肿瘤间质中(Bates DA,Mackillop WJ.Hyperthermia,adriamycin transport,and cytotoxicity in drug-sensitive and-resistant Chinese hamster ovary cells,Cancer Res(1986)46:5477-5481；Nagaoka S,Kawasaki S,Sasaki K,Nakanishi T.Intracellular uptake,retention and cytotoxic effect of adriamycin combined with hyperthermia in vitro.Jpn J Cancer Res(1986)77:205-211)。为此，温和的体温过高选择性地对肿瘤细胞致死，抗肿瘤效果随温度升高而增加。

热敏性脂质体将高浓度的化疗剂运载至实体瘤，支持血管系统，并且当加热时局部释放药物。体温过高选择性地提高脂质体摄取、脂质体渗透性、刺激局部药物释放、增加药物流入肿瘤细胞中、和增加药物结合肿瘤细胞DNA(后者对于许多化疗剂的作用机制很重要)。

为了开始使用体温过高治疗深部肿瘤(例如，前列腺、卵巢、结肠直肠和乳腺的肿瘤)，因此，期望设计能够响应温和的体温过高条件(即，在39-45℃范围内的临床可得到的温度)而递送治疗量的活性剂的脂质体制剂。