[发明专利]肽和抗体文库及其应用

权利要求书

1.一种鉴别靶的抗体的方法，所述方法包括：

a)提供得自哺乳动物的抗体文库，所述哺乳动物的免疫系统未受靶外来刺激，其中所述抗体文库包含少于10⁷个不同种类抗体；

b)将所述靶与所述抗体文库在适于所述靶与所述抗体文库中的抗体结合的条件下接触，如果这种抗体存在于所述抗体文库中；及

c)评估所述靶与所述抗体之间的结合以鉴别所述抗体是所述靶的抗体。

2.权利要求1的方法，其中所述抗体文库是通过用包含不同的、随机氨基酸序列的多个多肽免疫哺乳动物产生的。

3.权利要求2的方法，其中所述多肽包含大约10-20个氨基酸。

4.权利要求2或3的方法，其中所述多肽不包含Cys，不包含3个或更多个相同的连续氨基酸，和/或不包含5个或更多个相同氨基酸。

5.权利要求2-4任一项的方法，其中所述多肽通过如下标准选择：

a)为所有候选多肽指定初始的相同分值；

b)对于候选多肽中每个潜在糖基化位点则从初始分值减去1点；

c)对于候选多肽中每个Lys或Arg残基则从初始分值减去4点；及

d)针对希望数目的多肽，选择具有最高可能分值的候选多肽用以免疫哺乳动物。

6.权利要求2-5任一项的方法，其中所述哺乳动物用至少10000个多肽免疫。

7.权利要求6的方法，其中所述哺乳动物用至少10000、15000、20000、25000、30000、35000、40000、45000、50000、55000、60000、65000、70000、75000、80000、85000、90000、95000或100000个不同的多肽免疫。

8.权利要求2-7任一项的方法，其中所述多肽包含大约10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个氨基酸。

9.权利要求2-8任一项的方法，其中所述多肽包含天然和/或非天然氨基酸。

10.权利要求2-9任一项的方法，其中所述多肽是通过化学合成和/或重组产生方法产生的。

11.权利要求2的方法，其中所述多肽通过如下标准选自候选多肽：

a)每个候选多肽包含大约10个氨基酸，不包括Cys；

b)每个候选多肽不包含3个或更多个相同的连续氨基酸；

c)每个候选多肽不包含5个或更多个相同的氨基酸；

d)每个候选多肽被指定为初始分值为10；

e)对于候选多肽中每个潜在的糖基化位点，从初始分值中减去1点；

f)对于候选多肽中每个Lys或Arg，从初始分值中减去4点；及

g)选择具有最高分值的至少10000个候选多肽。

12.权利要求1的方法，其中所述抗体文库是由哺乳动物产生的，所述哺乳动物的免疫系统未被有意刺激。

13.权利要求12的方法，其中所述哺乳动物选自小鼠、大鼠和兔。

14.权利要求1的方法，其中所述抗体文库是由哺乳动物产生的，所述哺乳动物用完整生物体、组织、细胞或者所述生物体、组织或细胞的全部蛋白质提取物免疫，所述完整生物体、组织、细胞与所述靶是免疫学不同的。

15.权利要求14的方法，其中所述完整生物体选自拟南芥(Arabidopsis thaliana)、小鼠、大鼠、兔、牛、山羊、果蝇(Drosophila)、斑马鱼、秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)、水稻和玉米。

16.权利要求14的方法，其中所述组织选自血液、拟南芥芽、在不同发育阶段的秀丽隐杆线虫组织、以及小鼠脑组织。

17.权利要求14的方法，其中所述细胞选自脾细胞、肿瘤细胞和细胞系，如人肿瘤细胞系。

18.权利要求1的方法，其中所述抗体文库是由哺乳动物产生的，所述哺乳动物用与所述靶免疫学不同的抗原免疫。