[发明专利]人源化的嵌合抗因子C3抗体及其用途

说明书

相关申请

本申请要求2012年4月3日提交的美国临时申请系列No.61/619,860的优先权，该临时申请系列No.61/619,860要求2009年9月23日提交的美国专利申请系列No.12/532,740的优先权，这些申请的主题以引用方式全文并入本文。

技术领域

本申请涉及具有补体途径抑制功能的人源化嵌合抗体及其抗原结合片段，该抗体及其抗原结合片段具有降低的效应器功能和免疫原性。本发明的人源化嵌合单克隆抗体选择性地阻断因子B与C3b的结合，但不会抑制经典的激活途径。这些抗体不能抑制C3b与C5的相互作用，因此在抑制旁路途径中具有独特的功能。此类抗体可用于治疗其中补体旁路途径起到病理学作用的疾病迹象。

背景技术

补体系统是通过3条不同的途径激活的：经典途径、凝集素途径和补体旁路途径(AP)。经典途径是通过抗原-抗体复合物激活的。凝集素途径是经典途径的改变，旁路途径是通过外来物质、人工表面、死亡组织、细菌、死亡酵母细胞来激活的。

补体经典途径对于宿主防御对抗病原体是重要的。经典途径的激活产生C3a、C4a、C5a和C5b-9分子，它们响应于宿主防御而激活多种细胞。在致病条件下，作为旁路途径的激活结果，形成过敏毒素C3a、C5a，并形成组织破坏C5b-9分子，它们还被称为膜攻击复合物(MAC)。这些分子通过细胞激活而介导炎症并释放炎症介质。除了C5b-9作为细胞溶解性孔隙形成复合物的作用，强有力的证据表明亚溶解MAC的沉积在炎症中可以起到重要的作用。

补体旁路途径在病理学炎症中被激活。发现C3a、C5a和C5b-9水平的升高与多种急性和慢性疾病状况有关。这些炎症分子激活嗜中性粒细胞、单核细胞和血小板。因此，抑制疾病诱导的AP激活在疾病中(其中补体激活在疾病病理学中起作用)对于临床益处而言是重要的。

补体系统除了在免疫防御中的基本作用以外，其在许多临床状况中会促使组织损伤。补体生物化学级联中所包括的活性对宿主组织呈现潜在的威胁。实例包括不加选择地释放可能导致宿主细胞溶解的破坏性的酶。因此，迫切需要研发防止这些不利作用的治疗有效性的补体抑制剂。

在其中AP激活有助于疾病病理学的疾病状况下，在血清、血浆、血液或代表了疾病的其他体液中发现C3a、C5a和C5b-9的水平升高。这些分子的每一种分子通过不同机制的生产和抑制对于疾病都是重要的。用于抑制活性C3转化酶形成的一种可能的机制是通过使用抗C3b抗体。因此，通过耗尽C3b、中和C3b、C3c或使C3b失活来阻断/抑制或阻止AP激活仍为重要的治疗策略。

本发明涉及研发得到的人源化的嵌合抗体序列，该抗体序列是新型的，并且提供与因子C3b的靶向结合。C3b与B结合、但是C3b与C5不结合受到此类抗体的抑制。C3a、C5a和C5b-9都驱使发炎，并且还会放大AP激活过程。与C3b结合并阻止B的相互作用的抗C3b剂包括但不限于单克隆和多克隆的抗体，嵌合的、人源化的、全人类、及纳米抗体，全长的及它们的片段，包括IgG、Fab、Fab'、F(ab’)2和IgGs。适体、小分子和SiRNA还可以中和与C3b与B的结合，并阻止AP诱导生产的C3a、C5a和C5b-9的生产。结果，细胞激活、炎症和炎症介质的释放也都被阻止。由于AP激活与多种急性和慢性人类疾病关联，所以使用抗C3b剂进行阻断还将阻断炎症的过程，这可以为使用抗C3b单克隆抗体治疗的哺乳动物提供临床益处。

补体是与发病机理有关的多种因子之一，并且可以为临床控制提供有效点的重要的病理机制。越来越多地认识到补体介导的组织损伤在多种疾病状态中的重要性，意味着需要有效的补体抑制药品。尽管如此，目前完全缺乏人类用途的、特异性地靶向及抑制补体激活的批准药品。

根据可利用的临床和检索数据，显示在大多数的急性和慢性环境中，C3a和C5a的生产是通过补体途径的激活来介导的。在临床环境下，独立地显示C3a和C5a都有所涉及，研发用于所有途径的合适的抑制方法是非常理想的。已知过敏毒素C3a和C5a均激活白细胞和血小板。细胞激活的频繁指示剂在白细胞上是细胞表达的CD11b，在血小板上是CD62P。多种炎症分子的释放是通过血小板-白细胞的结合(由这些激活标志物所介导的)所引发的。此类缀合物形成的一个结果是由血液循环中除去血小板，这是可能有助于发展成血小板减少症的现象。

本发明计划通过使用抗C3b抗体来抑制C3b在病理学状况中的功能活性及其程序性作用。