[发明专利]用于监测HIV特异性T细胞应答的方法

权利要求书

1.一种用于测定对象中特异性针对病原体之T细胞应答的方法，其包括：i)使包含来自所述对象之T细胞的样品与包含来自所述病原体之抗原的组合物接触，以及ii)测定由所述样品中的所述T细胞产生的多种细胞因子的水平。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述包含抗原的组合物是抗原或抗原文库。

3.根据权利要求2所述的方法，其中来自所述病原体的所述抗原或所述抗原文库是来源于所述病原体之多肽的肽变体或肽变体文库。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述肽变体文库是切换肽。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述病原体是HIV或EBV。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述肽变体来源于Gag或Nef多蛋白。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述肽变体来源于p24或p17。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述多种细胞因子选自：表征Th1应答的细胞因子、表征Th2应答的细胞因子和二者皆有。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述表征Th1应答的细胞因子选自IFN-γ、TNF-α、MIP1-β、IL-2、IL-12和IL-1B。

10.根据权利要求8所述的方法，其中所述表征Th2应答的细胞因子选自IL-4、IL-5、IL-6、IL-10和IL-13。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中在CD4+细胞和/或CD8+细胞中测定所述表征Th1应答的细胞因子、所述表征Th2应答的细胞因子或二者皆有。

12.根据权利要求8至11中任一项所述的方法，其还包括测定表征Th9应答、Th17应答或Th22应答之细胞因子的水平。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中通过加强的流式细胞术测定所述多种细胞因子的水平。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述含有T细胞的样品是PBMC制备物。

15.一种用于鉴定高度暴露的持续血清反应阴性患者的方法，其包括：i)用HIV或EBV肽组合物孵育含有所述患者之T细胞的样品，以及ii)测定选自IL-1b、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-12p70、IL-13、IL-17和IL-22的一种或更多种细胞因子的水平，

其中一种或更多种所述细胞因子的表达水平相对于参考值升高表明所述患者是高度暴露的持续血清反应阴性患者。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述HIV肽组合物包含来源于Gag p24HIV蛋白或Gag p17HIV蛋白或Nef蛋白的肽。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述来源于Gag p24HIV蛋白或Gag p17HIV蛋白或Nef蛋白的肽是切换肽。

18.根据权利要求15至17中任一项所述的方法，其中所述含有T细胞的样品是PBMC制备物。

19.根据权利要求16至18中任一项所述的方法，其中各种细胞因子的参考值是含有来自HIV感染患者之T细胞的样品中所述细胞因子的表达水平。

20.根据权利要求15至19所述的方法，其中通过流式细胞术分析进行所述细胞因子水平的测定。

21.根据权利要求20所述的方法，其中所述流式细胞术分析是加强的流式细胞术。

22.一种试剂盒，其包含用于检测选自IL-1b、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-12p70、IL-13、IL-17和IL-22的一种或更多种细胞因子的试剂。

23.一种用于鉴别高度暴露的持续血清反应阴性患者的方法，其包括：i)用来源于HIV或EBV蛋白的肽组合物孵育所述患者的含有T细胞的样品，以及ii)测定Th1样应答、Th2样应答或Th17应答，其中所述细胞中Th1样应答、Th2样应答或Th17应答相对于参考值升高表明所述患者是高度暴露的持续血清反应阴性患者。