[发明专利]冻干以及水性抗CD40抗体制剂

说明书

技术领域

本发明涉及抗CD40抗体的药物制剂、其制备方法以及该制剂的用途。

背景技术

对于自体免疫性疾病，尽管可利用几种免疫抑制治疗，但是在很大部分患者群中仍存在对更有效和更安全的药物的需求。例如，尽管报道了B细胞耗竭/抑制疗法，如利妥昔单抗和贝利单抗(Belimumab)在类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)、系统性红斑狼疮、干燥综合征(syndrome)和多发性硬化中的效力，但是这些疗法仅在部分患病个体中有效，且使用利妥昔单抗具有伴随的进行性多灶性白质脑病的风险。而且，在这些自体免疫性疾病的病理中常常有多种其它类型的白细胞参与，如巨噬细胞、树突细胞和T细胞，因而，靶向其它细胞类型或靶向关键免疫通路以抑制其功能的治疗介入能够提供益处。考虑到CD40-CD154在这些细胞类型的活化和功能中多种免疫相关作用，抗CD-40抗体有可能对患有上述自体免疫性疾病的患者提供除目前疗法所提供的以外的治疗益处。而且，CD40-CD154相互作用在肠道炎性疾病如克罗恩病和溃疡性结肠炎中的主要作用，以及CD40通路与更罕见疾患如自体免疫性血管炎、寻常型天疱疮(pemphigus vulgaris)和特发性血小板减少性紫癜(ITP)中的机理关联也突出了抗CD-40抗体在这些适应症中的潜能。

目前存在的用于实体器官移植后的免疫抑制剂提供了优越的短期效力。在5％-20％的受体中观察到新生期内急性排斥(取决于器官，患者群和方案)，且在新生期内由于急性排斥反应失去移植物的比例对任何设置(setting)而言在5％以下。目前关键的未满足需要是患者对免疫抑制的耐受，和移植物的长期存活。肾移植后，33％的患者5年内死亡和/或失去其移植物；接受移植者的死亡平均年龄为58岁。钙调磷酸酶抑制剂(Calcineurin inhibitor，CNI)仍然是绝大多数移植患者的免疫抑制疗法的支柱。尽管与CNI相关的肾毒性和心血管疾病发病率是慢性移植肾病以及具有功能性移植物的患者死亡的驱动因素之一，可替代的主要免疫抑制一直没能取代CNI。总体而言，仍有改善长期移植的免疫抑制的需要。B细胞介导的对移植肾的免疫损伤可能会导致不良的长期结果，对靶向B细胞排斥的新制剂的需要越来越受到医学界的认可。

抗CD40抗体是本领域公知的。Chir12.12是完全人源化的，非激动剂抗CD40抗体(IgG1，κ)，其阻断CD154(也称为CD40配体；CD40L)介导的白细胞活化，并可以在体外介导人白细胞和B细胞淋巴瘤的抗体依赖的细胞的细胞毒性(ADCC)(参见WO2006/073443)。WO2005/044306描述了抗CD40拮抗性抗体，特别地包括Chir12.12用于自体免疫性疾病和炎性疾患治疗的用途中。而且，在食蟹猴(Macaca fascicularis)(食蟹猴)中作为单一疗法施用时，Chir12.12有效延缓肾移植排斥(Li et al.(2008)Transplantation；86(1):10-15)。然而，Chir12.12也可以在非人灵长类(NHP)中介导外周B细胞的耗竭。

预期ADCC活性沉默的抗CD40单抗相对于亲本抗CD40抗体具有改善的安全性的特征，特别是可能更适用于非肿瘤的适应症，如自体免疫性疾病和用于移植设置中。申请人已开发了三种基于Chir12.12抗体的沉默抗CD40抗体。这些抗体在下文中指定为mAb1、mAb2和mAb3，其特征在于沉默ADCC活性的Fc区的某些氨基酸突变。

mAb1包括抗体重链氨基酸序列中的N297A突变。该抗体包含分别为SEQ ID NO:3、4和5的重链CDR1、CDR2和CDR3，和分别为SEQ ID NO:6、7和8的轻链CDR1、CDR2和CDR3。mAb1包括具有氨基酸序列SEQ ID NO:1的V_H结构域和具有氨基酸序列SEQ ID NO:2的V_L结构域。mAb1包括全长重链氨基酸序列SEQ ID NO:9和全长轻链氨基酸序列SEQ ID NO:10。

mAb2包括抗体重链氨基酸序列中的D265A突变。该抗体包含分别为SEQ ID NO:3、4和5的重链CDR1、CDR2和CDR3，和分别为SEQ ID NO:6、7和8的轻链CDR1、CDR2和CDR3。mAb2包括具有氨基酸序列SEQ ID NO:1的V_H结构域和具有氨基酸序列SEQ ID NO:2的V_L结构域。mAb2包括全长重链氨基酸序列SEQ ID NO:13和全长轻链氨基酸序列SEQ ID NO:14。