[发明专利]包含E-钙粘蛋白的细胞外结构域的抑制剂的组合疗法

说明书

与相关申请的交叉引用

本申请要求2012年3月15日提交的美国临时申请号61/611,390的提交日期利益和2012年12月12日提交的美国临时申请号61/736,475的提交日期利益。这些先前申请的内容以其整体通过参考并入本文。

关于联邦资助的研究的陈述

本发明是在美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)的资助号为CA133910和ES015832的政府支持下做出。美国政府在本发明中具有一定权利。

发明领域

本发明的组合物和方法涉及对细胞-细胞粘附蛋白E-钙粘蛋白的细胞外结构域的可溶性部分sEcad以及MAPK-PI3K/Akt/mTOR、src和凋亡抑制剂(IAP：XIAP，存活素(survivin)，livin，c-IAP-1，c-IAP-2)信号传导途径中的细胞受体或细胞内效应物两者的靶向。

背景技术

E-钙粘蛋白是帮助维持内皮细胞-细胞粘附的整合跨膜糖蛋白。已证实，E-钙粘蛋白功能(全长)的丧失在皮肤、肺、胃、肠和乳腺的癌症中引起细胞去分化、增殖和增加的侵入性(Brouxhon等，Cancer Res.67(16):7654-7664,2007；Hirohashi,Am.J.Pathol.153(2):333-339,1998；Chen等，Cancer Lett.201:97-106,2003)。此外，在来自于乳腺癌患者的活检样本中E-钙粘蛋白染色的丧失，已与不良预后和短的无肿瘤转移时间相关联(Pederson等，Brit.J.Cancer 87:1281-1286,2002)。

全长蛋白由被命名为EC1-EC5的5个亚结构域构成的细胞外结构域、单一跨膜区和细胞质结构域构成(参见Shiraishi等，J.Immunol.175(2):1014-1021,2005)。距离细胞膜表面最远的EC1亚结构域含有在表达钙粘蛋白的细胞(包括表达E-、N-、P-和R-钙粘蛋白的细胞)中存在的组氨酸-丙氨酸-缬氨酸(HAV)三联体，并且该亚结构域被认为对于促进由E-钙粘蛋白介导的细胞-细胞接触来说是必需的(Beavon,European J.Cancer 36:1607-1620,2000)。

全长E-钙粘蛋白在跨膜结构域附近含有用于各种蛋白酶的切割位点，并且在所述位点处的切割产生被称为可溶性E-钙粘蛋白(sEcad)的～80-84kDa的可溶性N-端肽。sEcad的脱落在正常的未受刺激的上皮细胞中以低水平组成性地发生，并且在患有上皮来源的肿瘤例如乳腺、皮肤、肺、前列腺、胃和结肠直肠的癌症的患者中以高水平发生(Banks等，J.Clin.Pathol.48:179-180,1995；Baranwal等，Biochem.Biophys.Res.Com.384(1):6-11.2009；Chan等，Gut 48:808-811,2001；Charalabopoulos等，Exp.Oncol.28(1):83-85,2006；Kuefer等，Clin.Cancer Res.9:6447-6452,2003；Shirahama等，J.Dermatol.Sci.13:30-36,1996；Velikova等，Br.J.Cancer 77:1857-1863,1998)。也已报道，在正常的、非癌性狗肾细胞中，在诱导凋亡后sEcad的脱落增加(Steinhusen等，J.Biol.Chem.276:4972-4980,2001)。