[发明专利]电子蛋白分级分离有效

专利信息
申请号: 201380025068.9 申请日: 2013-03-19
公开(公告)号: CN104302656B 公开(公告)日: 2017-09-19
发明(设计)人: A·保勒斯;R·博戈夫;E·布罗德;U·司旺 申请(专利权)人: 生物辐射实验室股份有限公司;泰克尼翁研究发展基金有限公司
主分类号: C07K1/28 分类号: C07K1/28
代理公司: 上海专利商标事务所有限公司31100 代理人: 余颖
地址: 美国加利*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 电子 蛋白 分级 分离
【说明书】:

相关专利申请的交叉参考

本申请要求2012年4月4日提交的美国临时专利申请号61/620,245以及2013年3月14日提交的美国专利申请号13/803,564的优先权,上述文献都通过引用纳入本文以用于所有目的。

发明背景

在多种情况下,需要进行蛋白纯化。然而,蛋白纯化通常是繁琐且耗时的。

发明内容

本发明的各方面描述于该文本中。

在一些实施方式中,提供了设备。在一些实施方式中,所述设备包括:

被隔膜分为第一子腔室和第二子腔室的腔室,所述隔膜阻断或基本阻断了第一和第二子腔室之间的液体流动;且其中

第一子腔室与第一电极电连通;

第二子腔室与第二电极电连通;

第一子腔室与第一离子注射器/提取器流体连通;

第二子腔室与第二离子注射器/提取器流体连通;且

且第二子腔室包括出口。

在一些实施方式中,第一电极与第一子腔室被第一分离膜分开且第二电极与第二子腔室被第二分离膜分开,所述分离膜能渗透小离子但不能渗透较大分子。

在一些实施方式中,第一离子注射器/提取器包括第一电极且第二离子注射器/提取器包括第二电极。

在一些实施方式中,第二子腔室小于第一子腔室。

在一些实施方式中,第一电极是阳极且第二电极是阴极。在一些实施方式中,第一电极是阴极且第二电极是阳极。

在一些实施方式中,注射器/提取器直接连接至对应的子腔室。在一些实施方式中,注射器/提取器经由管道或通道连接至对应的子腔室。

在一些实施方式中,第二子腔室还包括一个或多个进口。在一些实施方式中,隔膜包括一层交联聚合物,从而抑制流体扩散。在一些实施方式中,隔膜含有孔,该孔允许小于分子截留值的肽通过但基本阻断大于所述分子截留值的肽通过。在一些实施方式中,分子截留值是约20kDa。

在一些实施方式中,注射器/提取器各包括:

a.与子腔室流体连通并通过阴离子选择性膜与子腔室分开的隔室;和/或

b.与子腔室流体连通并通过双极膜与子腔室分开的隔室;和/或

c.与子腔室流体连通并通过阳离子选择性膜与子腔室分开的隔室。

在一些实施方式中,该设备包括:

被隔膜分为第一子腔室和第二子腔室的腔室,该隔膜阻断或基本阻断了第一和第二子腔室之间的液体流动;且其中

第一子腔室与第一电极电连通,第一电极通过第一分离膜与第一子腔室分开;

第二子腔室与第二电极电连通,第二电极通过第二分离膜与第二子腔室分开,分离膜能渗透小离子但不能渗透较大分子。

第一子腔室与第一质子/阴离子注射器/提取器和第一氢氧根/阳离子注射器/提取器流体连通;

第二子腔室与第二质子/阴离子注射器/提取器和第二氢氧根/阳离子注射器/提取器流体连通;且

且第二子腔室包括出口。

在一些实施方式中,第二子腔室小于第一子腔室。

在一些实施方式中,第一电极是阳极且第二电极是阴极。在一些实施方式中,第一电极是阴极且第二电极是阳极。

在一些实施方式中,注射器/提取器直接连接至对应的子腔室。在一些实施方式中,注射器/提取器通过管或通道连接至对应的子腔室。

在一些实施方式中,第二子腔室还包括一个或多个进口。

在一些实施方式中,隔膜包括一层交联聚合物,从而抑制流体扩散。在一些实施方式中,隔膜含有孔,孔允许小于分子截留值的肽通过但基本阻断大于所述分子截留值的肽通过。在一些实施方式中,分子截留值是约10、15、20、25或30kDa,例如10-30kDa。

在一些实施方式中,质子/阴离子注射器/提取器各包括

a.与子腔室流体连通并通过阴离子选择性膜与子腔室分开的第一隔室;和

b.与子腔室流体连通并通过双极膜与子腔室分开的第二隔室。

在一些实施方式中,氢氧根/阳离子注射器/提取器各包括:

a.与子腔室流体连通并通过阳离子选择性膜与子腔室分开的第三隔室;和

b.与子腔室流体连通并通过双极膜与子腔室分开的第四隔室。

还提供了包含本文所述设备的系统,该设备通过导线连接至电源,可选地,该系统还包括泵、UV检测器、pH计和/或电导计。

还提供了从样品中纯化目标蛋白或肽的方法。在一些实施方式中,该方法包括:

提供上文所述或本文他处所述设备;

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