[发明专利]CD33抗体及其在治疗癌症中的用途

说明书

本发明提供了与CD33特异性结合的鼠科动物抗体、嵌合抗体和人源化抗体。所述抗体用于治疗和诊断各种癌症，也用于检测CD33。所述单克隆抗体包括在重链可变区中的SEQ NO:19、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:21的互补性决定区(CDRs)以及在轻链可变区中的SEQ NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24的CDRs。

交叉申请案的交互参照

本申请是US13/804,227(2013年3月14日提出申请)的延续申请，并且主张美国临时申请号为61/649,110(2012年5月18日提出申请)的优先权。

背景技术

CD33是67kDa的质膜蛋白，其与唾液酸结合并且是唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素蛋白(sialic acid-binding Ig-related lectin，SIGLEC)家族中的一员。CD33已知在骨髓细胞中表达。CD33在大量的恶性细胞中的表达也已有报道。虽然CD33已被定位用于癌症(如急性髓性白血病)的治疗，但目前市场上没有有效的CD33靶向治疗方法。本发明解决这些和其他问题。

发明内容

此处提供了与人类CD33蛋白特异性结合的单克隆抗体及使用单克隆抗体治疗癌症(表达CD33蛋白)的方法。单克隆抗体包含SEQ ID NOs:19,20和21在重链可变区的互补性决定区(CDRs)和SEQ ID NOs:22,23和24在轻链可变区的CDRs。在一些实施例中，至少一个CDR具有一个保守的氨基酸取代(conserved amino acid substitution)。在一些实施例中，分别源自SEQ ID NOS:18和SEQ ID NOS:8的成熟重链可变区的CDRs和成熟轻链可变区的CDRs的任何差异位于位点H60-H65。单克隆抗体可以是鼠科动物抗体、嵌合抗体或人源化抗体。优选的人源化抗体是h2H12抗体，如此处所公开。一方面，本发明是人源化抗体，其包括在重链可变区的SEQ ID NOs:19,20和21的CDRs以及在轻链可变区的SEQ ID NOs:22,23和24的CDRs并且另外具有一个成熟重链可变区和一个成熟轻链可变区，其中所述成熟重链可变区与SEQ ID NO:18具有至少90％的一致性，所述成熟轻链可变区与SEQ ID NO:8具有至少90％的一致性。此外，所述重链的以下氨基酸残基被保持：位点H48被I取代，位点H66被K取代，位点H67被A取代，位点H69被L取代，位点H71被A取代，H94被S取代；并且所述轻链的以下氨基酸残基被保持：L22被N取代，L46被T取代，L69被Q取代，L71被Y取代。在进一步的实施例中，所述人源化抗体包括在重链可变区的SEQ ID NOs:19,20和21的CDRs以及在轻链可变区的SEQ ID NOs:22,23和24的CDRs并且另外具有一个成熟重链可变区和一个成熟轻链可变区，其中所述成熟重链可变区与SEQ ID NO:18具有至少95％的一致性，所述成熟轻链可变区与SEQ ID NO:8具有至少95％的一致性。

在另一个实施例中，所述人源化2H12抗体具有成熟重链和成熟轻链，所述成熟重链与重链恒定区融合，且所述成熟轻链与轻链恒定区融合。在进一步的实施例中，所述重链恒定区是天然人恒定区的突变形式，且相比于所述天然人恒定区，所述天然人恒定区的突变形式与Fcγ受体的结合减少。在另一个实施例中，所述重链恒定区是IgG1同种型。示例性的重链恒定区氨基酸序列包括SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:29，其为位点239的半胱氨酸被丝氨酸取代(S239C)的重链恒定区。示例性的轻链恒定区氨基酸序列包括SEQ ID NO:25。

在一个实施例中，所述人源化抗体包括成熟重链可变区和成熟轻链可变区，所述成熟重链可变区具有SEQ ID NO:18的氨基酸序列，且所述成熟轻链可变区具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列。