[发明专利]用于诱导和扩增源自外周血单个核细胞的自然杀伤细胞的方法有效
申请号: | 201380028253.3 | 申请日: | 2013-05-07 |
公开(公告)号: | CN104321425B | 公开(公告)日: | 2018-08-10 |
发明(设计)人: | 李景美;林善雅;余嘉诚 | 申请(专利权)人: | 株式会社NKMAX |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783;C12N13/00;A61K35/17 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 黎艳;胡杰 |
地址: | 韩国*** | 国省代码: | 韩国;KR |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 诱导 扩增 源自 外周血 单个 细胞 自然 杀伤 方法 | ||
1.用于诱导和扩增源自外周血单个核细胞的自然杀伤(NK)细胞的方法,其中该方法包括:在存在细胞因子的条件下,将作为饲养细胞的经辐射的Jurkat细胞和经辐射的、由EB病毒转化的连续性淋巴细胞株(EBV-LCL)细胞与外周血单个核细胞进行共培养。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述外周血单个核细胞是从正常人、有患癌风险的患者或癌症患者中获得的。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述经辐射的Jurkat细胞和经辐射的EBV-LCL细胞是分别通过100~500Gy的辐射处理而获得的。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述细胞因子为选自IL-2、IL-15、IL-21、Flt3-L、SCF、IL-7、IL-12和IL18中的一种或多种。
5.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述细胞因子的使用浓度为50~1,000U/ml。
6.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述共培养进行7~30天。
7.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,在所述共培养中,所述外周血单个核细胞与饲养细胞的混合比为1:5~2:1。
8.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述方法进一步包括:在后续培养的第1天至第15天,加入所述经辐射的Jurkat细胞、经辐射的EBV-LCL细胞和所述细胞因子,以在诱导及增殖源自外周血单个核细胞的NK细胞后维持NK细胞。
9.一种预防和治疗癌症的药物组合物,该组合物包含根据权利要求1~8中任一项所述的方法中获得的源自外周血单个核细胞的自然杀伤细胞。
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