[发明专利]组合的γ9δ2T细胞受体链交换

说明书

本发明提供鉴定介导抗肿瘤响应的γ9δ2T‑细胞受体(γ9δ2TCR)的方法。令人惊讶的是，现在发现γ9‑T‑细胞受体链和δ2‑T‑细胞受体链(δ2TCR链)的CDR3区很重要。基于这些发现，组合的γδTCR‑链交换(CTE)被提议作为用于鉴定介导抗肿瘤响应的γ9δ2TCR的有效方法。使用本发明的方法，鉴定出介导抗肿瘤响应的各个γ9TCR和δ2TCR链的特定序列。因此，本发明进一步提供用于可以例如在癌症诊断或治疗中使用的特定γ9δ2TCR或其片段。本发明进一步提供可用于表达根据本发明的γ9δ2TCR的核酸序列、基因构建体和逆转录病毒载体。

技术领域

本发明涉及医学领域。其涉及用于癌症治疗的免疫学和细胞疗法。本发明还涉及用于T细胞受体、特别是可介导抗肿瘤响应的T细胞受体的识别方法。本发明还涉及在癌症治疗中介导抗肿瘤响应的特定T细胞受体及其在癌症治疗中的用途。

背景技术

到目前为止，异源干细胞移植(allo-SCT)是用于罹患癌症的患者的唯一公认和被证明疗效的细胞疗法。这由如下观察所证实，即在具有“弱风险”白血病的患者中长期缓解可特别采用allo-SCT来实现。然而，治愈以重度毒性的代价进行，导致治疗的患者大约30％的总死亡率。这阻碍了广泛的临床实施，因为特别是具有低风险癌症的患者可能具有良好的整体存活率，不能证明这种攻击性疗法(aggressive therapies)的适当性。因此，最终的目标仍然是非攻击性移植方法的发展。这意味着产生配备有分子特征的细胞产品，该分子特征允许选择性靶向癌细胞，同时保留健康组织。这将允许对具有医疗需求的大量患者的治愈性治疗，不论年龄如何。

为了设计移植物(可以是异源的或自体的)以促进例如肿瘤反应性αβT-细胞的快速生成，已经提出了用编码肿瘤特异性αβT-细胞受体(TCR)或嵌合抗原受体的基因来重编程αβT-细胞。数种这类受体已经用于在I期临床试验中重定向αβT-细胞。然而，用规定的αβTCR重编程αβT-细胞基本上因它们对HLA类型的限制而受阻，从而限制了可以采用一种αβ-TCR进行治疗的患者数量。此外，引入的αβTCR链与内源αβTCR链的配对可能诱发危及生命的自体反应。

已经提出了使用γ9δ2T-细胞的能力以高亲和性TCR介导选择性抗肿瘤反应来介导抗肿瘤反应，而忽略健康环境(Fisch等人,1990，Science250，1269-1273)。分离的γ9δ2T-细胞可有效地杀死血液学恶性肿瘤和实体瘤的肿瘤细胞(Kabelitz等人,2007，CancerRes.67，5-8)。然而，γ9δ2T-细胞的功能和增殖能力在癌症患者中常常严重受损，使得自体γ9δ2T-细胞对于免疫干预不那么有吸引力。

已经提出了将规定的γ9δ2TCR转移到αβT-细胞中，其介导αβT-细胞的肿瘤特异性增殖并且针对肿瘤细胞系的广泛组重定向效应物CD8+和辅助物CD4+αβT-细胞亚群，而在体外和体内的正常细胞可被忽略(Marcu-Malina等人,2011，Blood118，50-59)。然而，关于γ9δ2TCR如何介导针对肿瘤细胞的不同活性以及需要用什么策略来分离对癌细胞具有高活性的γ9δ2TCR，可得的知识极少。

因此，在本领域中存在提供对癌细胞具有高活性的γ9δ2TCR的需求，并且在本领域中存在提供用于选择这种高度活性的γ9δ2TCR的改进方法的需求。

发明内容