[发明专利]用于鉴定具有基因毒性的化合物的蛋白表达分析

权利要求书

1.一种用于就基因毒性和/或前基因毒性活性高通量筛选化合物的方法，包括测定用一种或多种化合物温育的系统中相对于未用所述化合物温育的系统中p-p53(Ser15)、p21、p-H2A.X(Ser139)、p-ATM(Ser1981)、p-Chk1(Ser345)、p-ATR(Ser428)、p-cdc2(Thr14/Tyr15)、Gadd45a和p-Chk2(Thr68)蛋白的活性形式的表达水平的步骤，其中用化合物温育的系统中相对于未用所述化合物温育的系统，所述蛋白的表达水平升高至少1.5倍表示所述基因毒性和/或前-基因毒性活性，并以至少80％的灵敏度和/或特异度筛选具有所述活性的化合物。

2.权利要求1的方法，其中通过免疫荧光染色或Luminex技术测定表达水平。

3.权利要求1的方法，其中施用降低的浓度的化合物以提供具有1至1.1倍的表达水平。

4.权利要求1至3的任一项的方法，其中具有最低前-基因毒性或最低基因毒性的化合物或者非-前-基因毒性或非基因毒性的化合物被鉴定，并且其中表达水平的最低升高或无升高表明所述化合物适合用于对该化合物所期望的用途。

5.测定取自哺乳动物的生物样品中的蛋白p-p53(Ser15)、p21、p-H2A.X(Ser139)、p-ATM(Ser1981)、p-Chk1(Ser345)、p-ATR(Ser428)、p-cdc2(Thr14/Tyr15)、Gadd45a和p-Chk2(Thr68)的表达水平的试剂在制备用于监控发生癌症、肿瘤、转移和/或血管生成障碍的可能性的试剂盒中的用途，所述疾病或障碍因响应利用化合物的治疗而导致的增殖、分化和/或损伤修复的失调引起、介导和/或传播，其中以至少80％的灵敏度和/或特异度测定所述蛋白的表达水平升高至少1.5倍表明所述化合物具有基因毒性和/或前-基因毒性活性并且所述可能性得以增加，所述哺乳动物需要利用给所述哺乳动物施用所述化合物的这样的治疗。

6.蛋白p-p53(Ser15)、p21、p-H2A.X(Ser139)、p-ATM(Ser1981)、p-Chk1(Ser345)、p-ATR(Ser428)、p-cdc2(Thr14/Tyr15)、Gadd45a和p-Chk2(Thr68)用作以至少80％的灵敏度和/或特异度高通量筛选化合物的基因毒性和/或前-基因毒性活性的标志蛋白的用途。

7.一种用于检测基因毒性和/或前基因毒性活性的试剂盒，其由分别特异性结合p-p53(Ser15)、p21、p-H2A.X(Ser139)、p-ATM(Ser1981)、p-Chk1(Ser345)、p-ATR(Ser428)、p-cdc2(Thr14/Tyr15)、Gadd45a和p-Chk2(Thr68)的抗体组成。