[发明专利]使用受体Na/K-ATPase/Src复合物进行的测定法和基于细胞的测试及其用途

权利要求书

1.鉴定改变Src活性的化合物的方法，所述方法包括：

(i)纯化α1Na/K-ATPase以获得Na/K-ATPase，其显示了高于800μmol Pi/mg蛋白质/h的特异活性；

(ii)将步骤(i)中纯化的Na/K-ATPase与Src混合，以形成Src活性受抑制的受体Na/K-ATPase/Src复合物；

(iii)将步骤(ii)中的受体Na/K-ATPase/Src复合物暴露于化合物，其中该化合物的结合将受抑制的Src从受体Na/K-ATPase/Src复合物释放，导致Src活性的增加；以及

(iv)测量Src活性的增加，其中增加的Src活性指示该化合物改变了Src活性。

2.权利要求1的方法，其中测量的步骤包括确定与Src活性的对照水平相比，是否有Src活性的增强水平，

其中Src活性水平的增加指示该化合物为激动剂，且，

其中相对于对照水平，Src活性水平的降低指示该化合物为拮抗剂。

3.权利要求2的方法，其中受体Na/K-ATPase/Src复合物的激动剂化合物包含至少一种以下物质：

激动剂化合物名称分子式乌本苷C₂₉H₄₄O₁₂地高辛C₄₁H₆₄O₁₄海蟾蜍毒素(MBG)C₂₄H₃₂O₅油酸C₁₈H₃₄O₂二十二碳六烯酸(DHA)C₂₂H₃₂O₂谷胱甘肽二硫化物(GSSG)C₂₀H₃₂N₆O₁₂S₂异硫氰酸烯丙酯C₄H₅NS

。

4.权利要求3的方法，其中受体Na/K-ATPase/Src复合物的激动剂包含乌本苷、地高辛、海蟾蜍毒素(MBG)、油酸、二十二碳六烯酸(DHA)、谷胱甘肽二硫化物(GSSG)和异硫氰酸烯丙酯中的至少两种。