[发明专利]设计的与血小板衍生生长因子结合的锚蛋白重复序列蛋白

说明书

技术领域

本发明涉及设计的具有与血小板衍生生长因子(PDGF)的结合特异性的锚蛋白重复蛋白，以及编码这类PDGF结合蛋白的核酸序列、包含这类蛋白质的药物组合物和这类蛋白质治疗疾病的用途。

背景技术

血小板衍生生长因子(PDGF)在三十多年前被确认为成纤维细胞、平滑肌细胞和神经胶质细胞的血清生长因子。最近的综述中(Andrae,J.,Gallini,R.和Betsholtz,C.,Genes Dev.,22,1276-1312,2008)广泛描述了它在生理学和医学上的作用。人PDGF最初被确定为二硫键连接的两条不同肽链(A(PDGF-A；人PDGF-A具有UniProtKB/Swiss-Prot编号P04085)和B(PDGF-B；人PDGF-B具有UniProtKB/Swiss-Prot编号P01127))的二聚体。因此，可以形成三种蛋白质二聚体：PDGF-AA、PDGF-AB和PDGF-BB。最近，鉴定了两种额外的PDGF多肽链，PDGF-C和PDGF-D。目前已知的PDGF基因和多肽属于结构和功能相关的生长因子家族，其也包括血管内皮生长因子(VEGF)。PDGF/VEGF生长因子在整个动物界是保守的。

PDGF通过两种具有共同域结构的受体酪氨酸激酶(RTK)，PDGF受体(PDGFR)α(PDGFRα)和β(PDGFRβ)，起作用，其包括5个细胞外免疫球蛋白(Ig)环和分裂的细胞内酪氨酸激酶结构域。VEGF通过不同的但结构相关的RTK亚家族起作用。配体结合促进受体二聚化，这启动信号传导。取决于配体的构造和受体表达的模式，可以形成不同的受体二聚体。然而，在体内似乎只有少数的相互作用似乎是相关的；即，经由PDGFRα的PDGF-AA和PDGF-CC，及经由PDGFRβ的PDGF-BB的那些相互作用。

PDGF在发育过程中有关键作用，但在成人中对于正常生理功能证据有限。动物发育中PDGF和PDGFR的研究揭示了PDGFRα信号传导在原肠胚形成以及在脑和心神经嵴、生殖腺、肺、肠、皮肤、中枢神经系统和骨骼发育中的作用。相似地，确定了PDGFRβ信号传导在血管形成和早期造血中的作用。PDGF信号传导牵涉广泛疾病。PDGF信号传导途径的自分泌激活与某些胶质瘤、肉瘤和白血病相关。通常在上皮细胞癌中观察到旁分泌的PDGF信号传导，其中它触发了基质募集(stromal recruitment)且可能参与上皮-间质转变，从而影响肿瘤生长、血管形成、侵袭和转移。PDGF驱动血管障碍(例如动脉粥样硬化、再狭窄、肺动脉高血压和视网膜疾病)以及纤维化疾病(包括肺纤维化、肝硬化、硬皮病、肾小球硬化和心脏纤维化)中的病理间质反应。

因此，提高的PDGF活性已经与几种疾病和病理状况关联。对于某些疾病已经确认了PDGF的致病性作用，为使用PDGF拮抗剂例如PDGF特异性抗体的治疗提供了前景。此外，已表明抗VEGF和抗PDGF剂的组合对于治疗某些眼部新生血管疾病有协同治疗效益(WO 2005/020972；Jo,N.,Mailhos,C.,Ju,M.,Cheung,E.,Bradley,J.,Nishijima,K.,Robinson,G.S.,Adamis,A.P.和Shima,D.T.,Am.J.Pathol.,168(6),2036-2053,2006)。