[发明专利]高转导效率的rAAV载体、组合物及其使用方法

权利要求书

1.一种经修饰的AAV衣壳蛋白：

(a)其中所述经修饰的AAV衣壳蛋白由氨基酸序列为SEQ ID NO：2的野生型AAV2衣壳蛋白修饰而得，其中所述修饰由K490、K527、K549或K556位置上的替代的谷氨酸(E)氨基酸残基组成；

(b)其中所述经修饰的AAV衣壳蛋白由氨基酸序列为SEQ ID NO：2的野生型AAV2衣壳蛋白修饰而得，其中所述修饰由K532位置上的替代的精氨酸(R)氨基酸残基组成；

(c)其中所述经修饰的AAV衣壳蛋白由氨基酸序列为SEQ ID NO：2的野生型AAV2衣壳蛋白修饰而得，其中所述修饰由K544和K556位置上的替代的谷氨酸(E)氨基酸残基组成；或

(d)其中所述经修饰的AAV衣壳蛋白由氨基酸序列为SEQ ID NO：8的野生型AAV8衣壳蛋白修饰而得，其中所述修饰由K547或K569位置上的替代的谷氨酸(E)氨基酸残基组成；并且

其中包含所述经修饰的AAV衣壳蛋白的载体的转导效率高于对应的未经修饰的野生型AAV载体。

2.根据权利要求1所述的经修饰的AAV衣壳蛋白，其中所述经修饰的AAV衣壳蛋白由氨基酸序列为SEQ ID NO：2的野生型AAV2衣壳蛋白修饰而得，其中所述修饰由K490、K527、K549或K556位置上的替代的谷氨酸(E)氨基酸残基组成。

3.根据权利要求1所述的经修饰的AAV衣壳蛋白，其中所述经修饰的AAV衣壳蛋白由氨基酸序列为SEQ ID NO：8的野生型AAV8衣壳蛋白修饰而得，其中所述修饰由K547或K569位置上的替代的谷氨酸(E)氨基酸残基组成。

4.根据权利要求1所述的经修饰的AAV衣壳蛋白，其中所述经修饰的AAV衣壳蛋白由氨基酸序列为SEQ ID NO：2的野生型AAV2衣壳蛋白修饰而得，其中所述修饰由K544和K556位置上的替代的谷氨酸(E)氨基酸残基组成。

5.根据权利要求1所述的经修饰的AAV衣壳蛋白，其中所述经修饰的AAV衣壳蛋白由氨基酸序列为SEQ ID NO：2的野生型AAV2衣壳蛋白修饰而得，其中所述修饰由K532位置上的替代的精氨酸(R)氨基酸残基组成。

6.一种分离的核酸分子，其编码根据前述权利要求中任一项所述的经修饰的AAV衣壳蛋白。

7.一种AAV载体，其包含权利要求1至5中任一项所述的蛋白质，并且其包含编码目的基因的重组核酸。

8.根据权利要求7所述的AAV载体，其中所述AAV载体是重组腺相关病毒颗粒或感染性rAAV病毒体。

9.一种组合物，其包含(a)根据权利要求1至5中任一项所述的经修饰的AAV衣壳蛋白、根据权利要求6所述的分离的核酸分子或根据权利要求7或8所述的AAV载体；以及(b)可药用缓冲剂、稀释剂或载剂。

10.根据权利要求9所述的组合物，其包含在用于诊断、预防、治疗或改善哺乳动物疾病或病症的一种或更多种症状的药盒中。

11.根据权利要求9或10所述的组合物，其用于诊断或治疗哺乳动物中的以下疾病，或者用于治疗、预防或改善哺乳动物中以下疾病的一种或更多种症状：癌症、糖尿病、自身免疫性疾病、肾病、心血管疾病、胰腺疾病、肠疾病、肝病、神经系统疾病、中风、局部缺血、进食障碍、α₁-抗胰蛋白酶(AAT)缺乏症、骨骼疾病、创伤或肺病。

12.根据权利要求9至11中任一项所述的组合物在制备药物中的用途，所述药物用于诊断、治疗、预防或改善哺乳动物中之疾病或病症的一种或更多种症状。

13.含有有效量的根据权利要求7或8所述之AAV载体的组合物在制备用于转导哺乳动物细胞群的试剂中的用途。