[发明专利]特异性结合到DLL4的新型单克隆抗体及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及特异性结合到delta样配体4(DLL4)的新型单克隆抗体，尤其涉及特异性结合到人delta样配体4以有效抑制delta样配体4和Notch受体之间的结合的单克隆抗体、编码该单克隆抗体的多核苷酸、包含该多核苷酸的表达载体、包含该表达载体的转化株、制备该单克隆抗体的方法、用于预防或治疗癌症的包含该单克隆抗体的药物组合物、包含该单克隆抗体的用于诊断癌症的组合物、使用该单克隆抗体诊断癌症的方法以及用于预防或治疗自身免疫性疾病的包含该单克隆抗体的药物组合物。

背景技术

据报道，Notch信号传导是脊椎动物和无脊椎动物进化上高度保守的，在发育初始阶段决定细胞命运上起着非常关键的作用。已知Notch信号传导是调节神经细胞、眼内细胞、淋巴细胞、肌细胞、血细胞等的分化的主要因素，也参与血管的发育。哺乳动物有四个Notch受体(Notch1、2、3和4)，且各Notch受体以300-350kDa大小的蛋白质形式合成，并在高尔基体中被弗林样转化酶在S1位点裂解从而在细胞表面形成异质二聚体。此外，在哺乳动物中发现四个Notch配体(jagged-1/2和delta样配体(DLL)1/3/4)。

Notch受体和配体均是膜蛋白且在两毗连细胞间的界面结合从而诱导Notch信号传导。当细胞互相接触时，胞外域直接互相接触以诱导信号传导，且出现根据配体和受体组合而不同的细胞反应。当配体和Notch受体在Notch信号传导中相互结合，Notch受体结构改变，然后经历两个连续的蛋白水解裂解。第一蛋白水解裂解开始于金属蛋白酶ADAM10/17(去整合素和金属蛋白酶10/17)/TACE(TNF-α转化酶)裂解胞外域(S2位点)。当S2位点裂解，Notch受体的跨膜区的S3位点接着被裂解。第二蛋白水解裂解由具有五个亚单位的γ-分泌酶复合物介导。γ-分泌酶复合物由早老素1、早老素2、nicastrin、Pen-2和Aph1组成。两蛋白水解裂解后，Notch胞内域(NICD)释放并迁移入细胞核。在细胞核内，NICD结合到转录抑制因子CSL(CBF-1/无毛抑制因子/Lag-1)以替代已结合到CSL的辅抑制物(CoR)。NICD/CSL复合物募集共活化剂(CoA)MAML(mastermind样)或p300从而激活和诱导Notch靶基因的表达，如细胞周期蛋白D1、p21、NF-κB、c-Myc、pre-Ta(前T细胞受体α链)、GATA3、NRARP和Deltex1。

已知激活的Notch信号传导在各种肿瘤模型中诱导肿瘤发生。当激活的Notch NICD在大鼠造血细胞内表达时，T细胞白血病/淋巴瘤发生，在约50％的T-ALL(T细胞急性成淋巴细胞白血病)中发现约50％激活的Notch 1(Weng AP等,Science 2004；306:71-269)。此外，对于乳腺癌，发现Notch 4受体在引入MMTV(小鼠乳腺瘤病毒)的大鼠(Czech II)内过表达，并报道在这些大鼠中发现乳腺肿瘤(Gallahan D等,Journal of Virology 1987；61:66-74)。据报道Notch受体和配体及Notch信号传导靶在各种癌症中被激活，如宫颈癌、肺癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌和前列腺癌(Miele L等,Clin Cancer Research 2006；12(4):1074-79)，且已知Notch 1受体与乳腺癌患者糟糕的预后相关(Reedijk M等,Cancer Reserach 2005；65:8530-7)，且与前列腺癌的转移相关(Santagata S等,Cancer Research 2004；64:6854-7)。