[发明专利]用于补偿在对粒子进行荧光测量期间试剂老化的方法，以及实施该方法的生物分析设备

权利要求书

1.一种用于补偿由于包括至少一种荧光化合物的储存在水相中的试剂的降解引起的荧光测量值误差并且允许鉴别粒子的方法，包括测量(62)用所述试剂标记的粒子的荧光水平FLUOm(t)的步骤，其特征在于该方法进一步包括以下步骤：

-在接近所述荧光水平FLUOm(t)测量的时间点的一个时间点t下在至少一个波长下对所述试剂的溶液进行吸光度测量(61)，以便测定该试剂的至少一个当前光密度OD(t)，并且，

-使用该无降解试剂的所述一个或多个当前光密度OD(t)和至少一个初始光密度OD(0)计算荧光水平FLUOm(t)的测量值的校正(63)以确定荧光水平的校正值FLUOc(t)。

2.如权利要求1所述的方法，其中该试剂包括至少一种聚甲炔型的荧光化合物。

3.如权利要求1和2中任一项所述的方法，其中该试剂包括噻唑橙。

4.如权利要求1和2中任一项所述的方法，该方法进一步包括以下步骤：

-计算对应于初始光密度OD(0)与当前光密度OD(t)的比率的比率K(t)，并且

-通过将在大约该测量时间点t对用该试剂标记的粒子测量的这些荧光水平FLUOm(t)乘以该比率K(t)来计算校正的荧光水平FLUOc(t)。

5.如权利要求4所述的方法，该方法进一步包括以下步骤：

-在数个波长λi下测量初始光密度ODi(0)和当前光密度ODi(t)，

-在所述波长λi下计算比率Ki(t)，并且

-在所述波长λi下计算校正的荧光水平FLUOci(t)。

6.如权利要求1和2中任一项所述的方法，该方法进一步包括以下步骤：

-预先确定一个降解模型，该模型建立了参考粒子的荧光水平变化ΔFLUO与该试剂由于其降解所致的光密度变化ΔOD之间的关系，并且

-从当前光密度OD(t)的测量值、从初始光密度OD(0)的测量值以及从所述降解模型计算荧光水平损失CP(t)。

7.如权利要求6所述的方法，该方法进一步包括以下步骤：

-以对应于荧光水平变化ΔFLUO与该试剂的光密度变化ΔOD的比率的系数α的形式预先确定一个降解模型，

-以该当前光密度OD(t)与该初始光密度OD(0)之间的差值乘以该系数α的形式计算荧光水平损失CP(t)，

-测定在统计学上代表这些测量的荧光水平FLUOm(t)的参考荧光值<FLUO(t)>，

-计算校正增量GC(t)，该校正增量对应于参考荧光值<FLUO(t)>除以所述参考荧光值<FLUO(t)>与该荧光水平损失CP(t)之间的差值，并且

-通过将在测量时间点t对用该试剂标记的粒子测量的这些荧光水平FLUOm(t)乘以该校正增量GC(t)来计算校正的荧光水平FLUOc(t)。

8.如权利要求6所述的方法，该方法进一步包括从在数个波长下光密度的测量值确定多个降解模型。

9.一种通过流式细胞术进行细胞分析的设备，包括用于对用试剂标记的粒子进行荧光水平测量的装置，其特征在于该设备进一步包括：

-用于在接近所述荧光水平测量的时间点的一个时间点t下在至少一个波长下对所述试剂的溶液进行吸光度测量以便测定该试剂的至少一个当前光密度OD(t)的装置，以及

-计算装置，该计算装置能够使用该无降解试剂的所述一个或多个当前光密度OD(t)和至少一个初始光密度OD(0)计算荧光水平FLUOm(t)的测量值的校正以确定荧光水平的校正值FLUOc(t)。

10.如权利要求9所述的用于细胞分析的设备，该设备包括一个用于通过分光光度法进行测量的单元。

11.如权利要求10所述的用于细胞分析的设备，其中该用于通过分光光度法进行测量的单元包括一个多色光源和一个感光器，该感光器配备有一个光学滤波系统，该光学滤波系统允许在不同中心波长λi下测量光密度。

12.如权利要求9到11中任一项所述的设备，该设备进一步包括一个血液学分析器。