[发明专利]具有改善的凝乳性质的凝乳酶变体

权利要求书

1.一种制备分离的凝乳酶多肽变体的方法，其包括以下步骤：

(a)：在具有凝乳酶活性的亲本多肽中的一个或多个位置制造改变，其中所述亲本多肽是野生型哺乳动物凝乳酶并且其中所述改变包含对应于SEQ ID NO:1中位置134的至少一个氨基酸位置的置换以及其中所述置换为134Q；以及

(b)：制备并分离步骤(a)中改变的多肽，从而得到分离的凝乳酶多肽变体，其中所述变体具有凝乳酶活性；

以及其中：

(i)：所述亲本多肽的氨基酸位置是通过使该亲本多肽与SEQ ID NO:1的多肽的比对确定的——即，SEQ ID NO:1的多肽用于确定所述亲本多肽中对应的氨基酸序列；以及

(ii)：所述亲本多肽是SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:2的成熟多肽，所述成熟多肽是从SEQID NO:2的氨基酸位置59到氨基酸位置381；

以及其中，与SEQ ID NO:2的成熟多肽相比，所述分离的凝乳酶多肽变体包含不多于5个的氨基酸改变，其中所述的分离的凝乳酶多肽变体具有：

-产生比包含SEQ ID NO:2的成熟多肽的骆驼凝乳酶的C/P比更高的C/P比的凝乳酶活性，

以及其中所述改变为如下氨基酸位置的置换：

H134Q+I154L+D216S；

H134Q+L280I+G309W；

Y79S+H134Q+Y365F+V375L；

S132F+H134Q+M200I+M215L+G221E。

2.一种通过如权利要求1所述的方法得到的分离的凝乳酶多肽变体。

3.一种分离的凝乳酶多肽变体，其包含：

(a)：具有凝乳酶活性的亲本多肽中一个或多个位置处的改变，其中所述亲本多肽是野生型哺乳动物凝乳酶并且其中所述改变包含对应于SEQ ID NO:1中位置134的至少一个氨基酸位置的置换以及其中所述置换为134Q；以及

(b)：其中所述变体具有凝乳酶活性；

以及其中：

(i)：所述亲本多肽的氨基酸位置是通过使该亲本多肽与SEQ ID NO:1的多肽比对确定的——即，SEQ ID NO:1的多肽用于确定所述亲本多肽中对应的氨基酸序列；以及

(ii)：所述亲本多肽是SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:2的成熟多肽，所述成熟多肽是从SEQID NO:2的氨基酸位置59到氨基酸位置381；以及

(iii)：所述分离的变体多肽具有与SEQ ID NO:2的成熟多肽少于100％序列同一性；以及

其中所述分离的变体具有产生比包含SEQ ID NO:2的成熟多肽的骆驼凝乳酶的C/P比更高的C/P比的凝乳酶活性；以及

其中，与SEQ ID NO:2的成熟多肽相比，所述分离的凝乳酶多肽变体包含不多于5个的氨基酸改变，以及

其中所述改变为如下氨基酸位置的置换：

H134Q+I154L+D216S；

H134Q+L280I+G309W；

Y79S+H134Q+Y365F+V375L；

S132F+H134Q+M200I+M215L+G221E。

4.一种制造食品或饲料产品的方法，其包括将有效量的如权利要求2或3所述的分离的凝乳酶多肽变体加入食品或饲料成分中并进行进一步制作步骤以得到所述食品或饲料产品；以及

其中所述产品是基于乳的产品并且其中所述方法包括将有效量的如权利要求2或3所述的分离的凝乳酶多肽变体加入乳中并进行进一步制作步骤以得到所述基于乳的产品；以及

其中所述乳为豆乳、绵羊乳、山羊乳、水牛乳、牦牛乳、羊驼乳、骆驼乳或牛乳；以及

其中所述的基于乳的产品是发酵乳制品、夸克或奶酪。