[发明专利]具有氨基酸取代的人源化抗TrkA抗体

说明书

相关专利申请的交叉引用

本申请要求2012年6月8日提交的美国临时专利申请No.61/657,184的优先权益，其以引用方式全文纳入本文。

技术领域

本发明概而言之涉及针对TrkA受体的抗体及其用途，包括人源化抗TrkA抗体以及使用抗TrkA抗体的治疗方法。一方面，本发明涉及具有增强的抑制性能的人源化抗TrkA抗体。

另一方面，本发明涉及包含重链可变区、轻链可变区、人轻链恒定区和交换性能改变的变体人IgG4重链恒定区的具有增强的抑制性能的人源化抗TrkA抗体。

背景技术

神经营养因子属于与NGF家族第一个成员(Levi-Montalcini R(1987)EMBO J.6(5):1145-54)结构上相关的肽生长因子家族(Barde YA(1994)J.Neurobiol.25(11):1329-33)。神经营养素调节周围神经元和中枢神经系统的神经元分化和存活，以及突触传递。此外，NGF可作用于多种非神经组织和细胞例如免疫细胞。NGF起作用是通过存在于靶细胞中的两种膜受体，低亲和力p75受体和140kDa高亲和力跨膜糖蛋白，TrkA(Kaplan DR et al.,(1991)Science252(5005):554-8；Klein R et al.,(1991)Cell 65(1):189-97)具有酪氨酸激酶活性。TrkA在基底前脑和纹状体的神经嵴神经元、交感神经元以及胆碱能神经元中表达，其作为NGF活性的重要介质(Holtzman DM et al.,(1992)Neuron 9(3):465-78；Verge VM et al.,(1992)J.Neurosci.12(10):4011-22)。TrkA也在某些非神经组织和细胞包括B淋巴细胞中表达(Torcia M et al.,(1996)Cell 85(3):345-56)。

神经生长因子(NGF)最初被鉴定为正在发育的神经系统中感觉和交感神经元的存活因子(Gorin PD&Johnson EM(1979)PNAS USA,76(10):5382-6)。成体内，NGF不是存活所必需的，但是其在数种急性和慢性疼痛状态产生疼痛和痛觉过敏时起重要作用。在受伤的和炎性组织中NGF高表达，并且trkA对伤害性感受神经元的激活通过多种机制引发并产生疼痛信号。在动物模型中通过中和NGF生物活性可显著减少炎症相关的疼痛(Woolf CJ et al.,(1994)Neuroscience 62(2):327-31；McMahon SB et al.,(1995)Nat.Med.1(8):774-80；Koltzenburg M et al.,(1999)Eur.J.Neurosci.11(5):1698-704)，显示该神经营养因子水平增加是产生全痛觉过敏反应所必需的。值得注意地，对其他神经营养因子的抑制不会抵消诱导的痛觉过敏，表明所述效应是NGF特异的(McMahon SB et al.,(1995)Nat.Med.1(8):774-80)；此外，NGF抑制可在不同的神经病变相关的疼痛的治疗方案中起镇痛作用(Koltzenburg M et al.,(1999)Eur.J.Neurosci.11(5):1698-704；Ro LS et al.,(1999)Pain 79(2-3):265-74；Theodosiou M et al.,(1999)Pain,81(3):245-55；Christensen MD&Hulsebosch CE(1997)Exp.Neurol.147(2):463-75)。在疼痛治疗中存在很大的、未满足的医疗需求。主要种类的镇痛剂：非固醇类抗炎药(NSAID)和阿片制剂受限于他们的有效性和耐受性(Hefti FF et al.,(2006)Trends Pharmacol.Sci.27(2):85-91)。低于30％的慢性疼痛患者通过当前的治疗方法可获得充分地缓解，并且具有许多副作用，特别是长期给药时(Kalso E et al.,(2004)Pain 112(3):372-80)。公认NGF在成体的疼痛机制中具有重要作用，这提供了开发全新种类的疼痛治疗的可能。

靶向TrkA而不靶向NGF可代表一种更好的治疗选择，由于该受体不干扰由p75受体介导的NGF功能，后者在神经元发育中具有广泛的功能。