[发明专利]CHO表达系统

权利要求书

1.一种中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系，其包含脱氧核糖核酸(DNA)表达载体，并且其中所述载体包含编码异源哺乳动物谷氨酰胺合成酶(GS)的核苷酸序列和至少一种用于表达重组蛋白的表达盒，其中所述GS包含如下序列：

-与SEQ ID NO:1的序列或与SEQ ID NO:2的序列至少94.5％相同的序列；或

-由SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的至少100个连续氨基酸的片段组成的序列。

2.根据权利要求1所述的CHO细胞系，其中所述GS包含与SEQ ID NO:1的序列并且与SEQ ID NO:2的序列至少94.5％相同的序列。

3.根据权利要求1或2所述的CHO细胞系，其中所述GS包含与SEQ ID NO:1的序列至少97.5％相同的序列。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的CHO细胞系，其中所述GS是人GS。

5.根据权利要求4所述的CHO细胞系，其中所述GS包含SEQ ID NO:1的序列。

6.根据权利要求1或2所述的CHO细胞系，其中所述GS是家犬GS。

7.根据权利要求6所述的CHO细胞系，其中所述家犬GS包含SEQ ID NO:2的序列。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的CHO细胞系，其中已使所述编码GS的序列的三联密码子偏向于在CHO细胞中的表达。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的CHO细胞系，其中所述编码GS的序列包含与SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:9的序列至少80％相同的序列。

10.根据权利要求9所述的CHO细胞系，其中所述编码GS的序列包含SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:9的序列。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的CHO细胞系，其中将所述编码人GS的序列置于猿猴空泡病毒40(SV40)启动子的调控之下。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的CHO细胞系，其中所述重组蛋白是单克隆抗体。

13.根据权利要求12所述的CHO细胞系，其中所述载体包含适用于克隆抗体轻链的第一表达盒和适用于克隆抗体重链的第二表达盒。

14.根据权利要求13所述的CHO细胞系，其中所述第一和第二表达盒各自包含CMV启动子。

15.根据权利要求1-14中任一项所述的CHO细胞系，其中所述CHO细胞系能够在不含血清的培养基中生长。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的CHO细胞系，其中所述CHO细胞系是以保藏号CCL-61保藏在ATCC的细胞系。

17.根据权利要求1-16中任一项所述的CHO细胞系，其特征在于在将所述载体转染至所述以保藏号CCL-61保藏在ATCC的CHO细胞系中时，其允许获得产生至少1mg/L重组蛋白的克隆。

18.根据权利要求1-17中任一项的CHO细胞系，其中所述载体不含用于表达的异源基因。

19.根据权利要求1-18中任一项所述的CHO细胞系，其中所述载体包含至少一个编码重组蛋白的序列。

20.根据权利要求19所述的CHO细胞系，其中所述重组蛋白是单克隆抗体。

21.根据权利要求19所述的CHO细胞系，其中所述重组蛋白是抗原性蛋白。

22.一种脱氧核糖核酸(DNA)表达载体，其中所述载体包含在猿猴空泡病毒40(SV40)启动子调控下的编码异源哺乳动物谷氨酰胺合成酶(GS)的核苷酸序列、在CMV启动子调控下的适用于克隆异源重组蛋白的第一表达盒，其中所述GS包含如下蛋白质序列：

a)与SEQ ID NO:1的序列或与SEQ ID NO:2的序列至少94.5％相同的序列；或

b)由SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的至少100个连续氨基酸的片段组成的序列。

23.根据权利要求22所述的DNA载体，其中所述载体是如权利要求20或21中所限定规定载体。