[发明专利]针对分化簇3(CD3)的人源化的抗体

说明书

公开了针对人分化簇3(CD3)的人源化的单克隆抗体(mAb)或其片段，其赋予提高的免疫刺激和稳定性。还公开了包括所述单克隆抗体的药物组合物以及治疗和任选地还预防容易通过结合CD3改善的疾病和病症疾患例如自身免疫性疾病疾患、感染性疾病，和移植物排斥的方法。

优先权声明

本申请要求2012年6月14日提交的美国临时申请序列号61/659,717的权益。前述的全部内容通过引用并入本文。

发明领域

本发明涉及特异性结合人CD3(分化簇3)的人源化的单克隆抗体，和其片段，任选地包括至少可变区，所述可变区包括特定框架突变和特定CDR。本发明还公开了用于产生和使用公开的抗体的药物组合物和方法。

背景技术

涉及通过抗原特异性T细胞受体(TCR)的抗体诱导信号传导的免疫治疗策略已经被显示改善自身免疫性和炎性疾病，其可能是通过调节对自身抗原的免疫应答。CD3(Cluster of Differentiation 3,分化簇3)是这样的受体的一个实例。特别地，注射的抗CD3单克隆抗体(mAb)治疗已经被证明在预防和逆转NOD小鼠中糖尿病的发作(Belghith等,Nat Med 9:1202-8,2003)和在治疗患有1型糖尿病的受试者中(Herold等,N Engl J Med346:1692-82,2002)有效。抗CD3抗体也逆转了Lewis大鼠中的实验性变应性脑脊髓炎(EAE)，对T辅助1型(Th1)介导的免疫性具有抑制效应(Tran等,Intl Immunol 13:1109-20,2001)。Orthoclone OKT3(莫罗单抗-CD3；Ortho Biotech Products，Bridgewater,NJ)是被批准用于治疗移植后的移植物排斥的静脉注射的鼠抗CD3IgG2a mAb(Chatenoud,Nat RevImmunol 3:123-32,2003)。注射OKT3后，CD3⁺T细胞被从循环去除，这在逆转在肾、肝和心脏移植接受者的皮质类固醇抗性急性移植物排斥反应中有效。开发了对CD3特异性的人源化的mAb，其还对Fcγ受体具有减少的结合。这些人源化的抗体包括otelixizumab、teplizumab和visilizumab。

美国专利号7,883,703(Weiner等)公开了，抗CD3抗体在口服或粘膜施用时用于自身免疫性疾病的治疗中也是有用的。这样的口服或粘膜施用的成功包括在粘膜免疫系统中的调节性T细胞(Treg)的活化，其转而导致了不希望的免疫系统的效应的改善或下调，因此改善了或至少减少了自身免疫和炎性疾病的病理学。口服或粘膜途径相对于全身途径施用抗CD3mAb的优势是避免严重不良事件(AE)和与全身施用抗CD3 mAb相关的泛发的免疫抑制的能力。

发明概述

对于提供不具有免疫原性、适合口服或粘膜施用、具有改善的药学稳定性和具有生物学活性的结合CD3的改善的mAb和抗体片段存在未满足的需求。

为了产生结合蛋白CD3的改善的人源化的mAb的目的，意外地发现了，在可变(V)框架区(FR)中的特定突变与特定的互补决定区(CDR)序列的组合，产生了具有改善的性质特别是生物活性和药学稳定性的人源化的mAb。这样的突变和CDR的组合之前从未被公开、暗示、或预期。因此，提供了针对CD3的改善的人源化的mAb，以及包含其的药物组合物，以及其用于治疗容易通过结合至CD3改善的疾病的方法，其中“治疗”还可任选地包括预防。

根据至少一些实施方案，本发明提供了结合CD3的mAb或其抗体片段，包括至少V区，其中所述抗体或抗体片段包括SEQ ID NO:1-6列出的6个CDR和包括特定的点突变的人源化的FR，其使得所述mAb更加药学稳定和生物学活性。

根据本发明的一些实施方案，所述的mAb包括人恒定(C)区。

根据本发明的一些实施方案，所述的重(H)链C区选自以下组成的组：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA和IgM。