[发明专利]RPGR X染色体连锁视网膜退化的AAV介导的基因治疗

说明书

发明背景

光受体与视网膜色素上皮细胞(RPE)协同发挥作用以优化光子捕获并生成被传输至更高的视觉中心并作为可视图像感知的信号。视网膜光受体中视觉过程的破坏会导致失明。视网膜中的遗传缺陷通过多种机制导致大量的视觉损伤疾病。

在光受体营养不良中，X染色体连锁形式的视网膜色素变性(XLRP)是严重视力丧失的最常见原因之一。超过25年前，已鉴定到了遗传位点并随后发现了潜在的基因缺陷。视网膜色素变性GTP酶调节因子(RPGR)基因中突变所引起的人XLRP是在XLRP中占大多数的严重早发视网膜退行性疾病。视网膜色素变性GTP酶调节因子(RPGR)基因中的突变占XLRP病例中的超过70％，且RPGR中的突变热点外显子ORF15在22-60％的患者中突变。该疾病不断发展，大多数患者在40岁前成为法定的盲人。

直到最近，在揭示由突变导致PR变性的分子机制和在开发对大部分RP形式(包括RPGR-XLRP)有效的治疗方法方面，进展仍较为缓慢。疾病相关的动物模型对开发和验证新疗法至关重要。对于RPGR-XLRP，同时存在小鼠和犬模型。在狗中，ORF15中两种天然产生的不同微缺失导致不同的疾病表型。X染色体连锁进行性视网膜萎缩1(XLPRAl；缺失1028-1032)具有230个残基的C端截短；该疾病是青少年的，但出现时是后发的并在数年中发展。相反地，与XLPRA2(缺失1084-1085)相关的两个核苷酸的缺失导致了移码并包括改变推定蛋白等电点的34个碱性氨基酸并截短了末端的161个残基。该疾病是早发且迅速发展的。两种模型都对应于人XLRP的疾病谱，且虽然在相对严重性方面存在差别，但其相当于生命的第一个十年内发生的人类疾病。

目前，对于患有XLRP的人患者，没有成功的治疗。需要一种RPGR-XLRP的治疗方法，该治疗方法是有效的、安全的且具有长期稳定性。

发明内容

在一个方面，本发明提供了一种预防、阻止或缓解对象中视网膜色素变性相关视力丧失的方法。该方法包括给予对象有效浓度的组合物，该组合物包含携带编码正常RPGR基因的核酸序列或其片段的重组腺相关病毒(rAAV)以及药学上可接受的运载体，所述核酸序列或其片段处于在对象的眼部细胞中表达基因产物的调节序列的控制下。

在另一个方面，提供了一种在有此需要的对象中预防或阻止光受体功能丧失或者提高光受体功能的方法。该方法包括给予对象有效浓度的组合物，该组合物包含携带编码正常RPGR基因的核酸序列或其片段的rAAV以及药学上可接受的运载体，所述核酸序列或其片段处于在对象的眼部细胞中表达基因产物的调节序列的控制下。结果是，对象的视力提高或视力丧失得到阻止和/或缓解。

在另一个方面，本发明提供了一种改进有此需要的对象中光受体结构的方法。该方法包括给予对象有效浓度的组合物，该组合物包含携带编码正常RPGR基因的核酸序列或其片段的rAAV以及药学上可接受的运载体，所述核酸序列或其片段处于在对象的眼部细胞中表达基因产物的调节序列的控制下。结果是，对象的视力提高或视力丧失得到阻止和/或缓解。

在另一个方面，提供了一种预防、阻止或缓解有此需要的对象中外网状层(OPL)异常的方法。该方法包括给予对象有效浓度的组合物，该组合物包含携带编码正常RPGR基因的核酸序列或其片段的rAAV以及药学上可接受的运载体，所述核酸序列或其片段处于在对象的眼部细胞中表达基因产物的调节序列的控制下。结果是，对象的视力提高或视力丧失得到阻止和/或缓解。

在另一个方面，本发明提供了一种预防、阻止或缓解有此需要的对象中双极细胞树突收缩(bipolarcelldendriteretraction)的方法。该方法包括给予对象有效浓度的组合物，该组合物包含携带编码正常RPGR基因的核酸序列或其片段的rAAV以及药学上可接受的运载体，所述核酸序列或其片段处于在对象的眼部细胞中表达基因产物的调节序列的控制下。结果是，对象的视力提高或视力丧失得到阻止和/或缓解。

在另一个方面，提供了一种预防、阻止或缓解有此需要的对象中双极细胞功能丧失的方法。该方法包括给予对象有效浓度的组合物，该组合物包含携带编码正常RPGR基因的核酸序列或其片段的rAAV以及药学上可接受的运载体，所述核酸序列或其片段处于在对象的眼部细胞中表达基因产物的调节序列的控制下。结果是，对象的视力提高或视力丧失得到阻止和/或缓解。