[发明专利]荧光融合多肽、包含所述多肽的生物感应器及其用途

权利要求书

1.一种荧光融合多肽，能够在细胞质中的第二信使浓度增加时，将自己在细胞中的定位从细胞质膜转移至滞留囊泡中，所述多肽包括膜定位肽、第二信使转导蛋白结合肽、内质网滞留信号和荧光肽，其中：

a.所述膜定位肽位于所述荧光融合多肽的N端，且物理性地连接在所述荧光肽上，该连接通过连接子实现；而所述荧光肽物理性地连接在所述第二信使转导蛋白结合肽上，该连接通过连接子实现；以及

b.所述第二信使转导蛋白结合肽物理性地连接在所述内质网滞留信号上，该连接通过连接子实现，而所述内质网滞留信号位于所述荧光融合多肽的C端；其中，所述膜定位肽是指其天然胞内定位位于质膜中的肽。

2.根据权利要求1所述的荧光融合多肽，其特征在于，所述多肽能够在细胞质中的第二信使浓度增加时将自己在细胞中的定位从细胞质膜转移至滞留囊泡中，且所述第二信使选自：钙、cAMP或甘油二酯。

3.根据权利要求1或2所述的荧光融合多肽，其特征在于：

a.所述膜定位肽是如SEQ ID No 17所示的白细胞介素-2受体的胞外域；以及

b.所述内质网滞留信号是选自KDEL、HDEL、KKXX、KXKXX和RXR的多肽，其中X为任意氨基酸。

4.根据权利要求1或2所述的荧光融合多肽，其特征在于，

a.所述膜定位肽是如SEQ ID NO 17所示的白细胞介素-2受体的胞外域；以及

b.所述内质网滞留信号是KDEL。

5.根据权利要求1所述的荧光融合多肽，其特征在于，所述多肽能够在胞内钙浓度增加时，将自己在细胞中的定位从细胞质膜转移至滞留囊泡中，且所述第二信使转导蛋白结合肽包括钙调素结合序列。

6.根据权利要求5所述的荧光融合多肽，其特征在于，所述钙调素结合序列选自SEQ ID No 1、SEQ ID No 2、SEQ ID No 3、SEQ ID No 4、SEQ ID No 5、SEQ ID No 6、SEQ ID No 7和SEQ ID No 8。

7.根据权利要求5或6所述的荧光融合多肽，其特征在于，所述内质网滞留信号为KDEL。

8.根据权利要求5所述的荧光融合多肽，其特征在于，所述膜定位肽是如SEQ ID NO 17所示的白细胞介素-2受体的胞外域。

9.根据权利要求5所述的荧光融合多肽，其特征在于，所述荧光肽选自GFP、YFP、turboGFP、tRFP和tRFP602。

10.根据权利要求5所述的荧光融合多肽，其特征在于，

a.所述钙调素结合序列选自：SEQ ID No 1、SEQ ID No 2、SEQ ID No 3、SEQ ID No 4、SEQ ID No 5、SEQ ID No 6、SEQ ID No 7和SEQ ID No 8；

b.所述膜定位肽是如SEQ ID NO 17所示的白细胞介素-2受体的胞外域；以及

c.所述内质网滞留信号为KDEL。

11.根据权利要求5所述的荧光融合多肽，其特征在于，所述多肽包含SEQ ID No 15。

12.根据权利要求1所述的荧光融合多肽，其特征在于，所述多肽能够在胞内cAMP浓度增加时，将自己在细胞中的定位从细胞质膜转移至滞留囊泡中，且所述第二信使转导蛋白结合肽包含与PKA的RI和RII调控域结合的结合序列。

13.根据权利要求12所述的荧光融合多肽，其特征在于，所述与PKA的RI和RII调控域结合的结合序列选自：SEQ ID No 9、SEQ ID No 10、SEQ ID No 11、SEQ ID No 12、SEQ ID No 13和SEQ ID No 14。

14.根据权利要求12或13所述的荧光融合多肽，其特征在于，所述内质网滞留信号为KDEL。

15.根据权利要求12所述的荧光融合多肽，其特征在于，所述膜定位肽为白细胞介素-2受体的胞外 域。

16.根据权利要求10所述的荧光融合多肽，其特征在于，所述荧光肽选自：GFP、YFP、turboGFP、tRFP和tRFP602。