[发明专利]探察并测定凝集反应的方法

说明书

用于执行和分析凝集检测的方法、组成、系统和设备在此被提供。一方面，用于凝集反应成像分析的方法被提供。另一方面，实施凝集反应的方法被提供。一方面，该方法可能被用来探察不同的分子，包括病毒或对抗一种病毒的抗体。另一方面，该方法可以用来确定一位研究对象免疫接种的有效性。

交叉引用

本申请声明拥有2012年7月18日提交的美国临时申请序列号61/673,215的权益，此项申请以引用方式被完全纳入本文。

背景资料

分子或细胞的聚集或凝集反应形成了多种有用的生物学检测基础。血细胞凝集或凝血反应是涉及红细胞(RBCs)的一种特定形式的凝集反应。该现象被实验室用来确定血型、确定一份血液样本中病毒的表达和数量，以及对特定的抗感染反应抗体进行定量分析。血液凝集反应导致RBCs形成能够稳定对抗中等程度震动或搅动的宏观点阵结构，这些结构通过视觉观察可以很容易地与未发生凝集的RBCs进行区别，这是多种传统检测方法的基础。

血液凝集可以通过病毒、细菌、抗体以及其他一些因素(例如外源凝集素)触发。例如与A型抗原结合的抗体会诱发含有A型或AB型RBCs的样本出现凝集反应。同样，与细胞表面分子结合的病毒和病毒抗原可以诱发血液凝集。病毒可能含有“血凝素”蛋白，该蛋白与宿主细胞上的分子相结合。例如，血凝素蛋白可能与诸如RBCs的宿主细胞膜上的唾液酸相结合。在对含有病毒的一份样本进行不同程度的稀释后，通过对血液凝集反应的观察可以大概估计出该病毒的滴度。使用这种方法也可以发现细菌并对其进行定量分析。

尽管血液凝集检测非常有用，但是目前的方法检测速度相对缓慢、主观性强，而且用于某些检测目的时不够可靠。传统的预处理操作程序可以占用长达12-24小时，而且视觉检查对于定量分析并不是一个稳健可靠的方法。血液凝集检测经常在一些分秒必争的情况下被实施(例如为了防止病毒扩散或在紧急输血期间)，因此在技术上急需用来探察并测定聚集/凝集反应的改良方法。

摘要

用于提高凝集检测的方法、组成、系统和设备在此被提供。一方面，用于凝集反应分析的改良后的成像技术被提供。另一方面，用于减少凝集反应时间并(或)提高凝集反应检测准确性的方法被提供。另一方面，用于凝集反应的改良试剂被提供。还有一方面，改进后的用于执行或分析凝集反应的设备被提供。额外的一些改进措施也被提供，而且本发明包括其他一些方面。此处显示的多种改进措施可能被结合在一起使用。

一方面，一种用于探测一份生物学样本内一种抗体表达的方法被提供，其中该抗体选择性地与一种病毒颗粒结合。该方法包括的步骤有：(a)在允许红细胞通过与病毒颗粒的相互作用而产生凝集反应的条件下，对红细胞、病毒颗粒和怀疑含有该抗体的生物学样本混合液进行孵育；(b)探察该混合液中是否发生了凝集反应，其中无凝集反应发生说明存在该抗体；所述步骤(a)-(b)在不到一个小时内完成。另一个与之有关但不同的方面中，其方法包括：(a)在允许红细胞通过与病毒颗粒的相互作用而产生凝集反应的条件下，对红细胞、病毒颗粒和怀疑含有该抗体的生物学样本混合液进行孵育；(b)在一种光学设备的辅助下对该混合液拍摄一幅图像，其中存在一种红细胞-病毒颗粒凝集簇则表明发生了凝集反应，不存在可探察到的抗体数量；而缺乏该凝集簇则表明无凝集反应发生，且存在一个可探察到的抗体数量。一些实例中，该混合液的一幅显微图像被获得。