[发明专利]抗体精制用阳离子交换色谱法载体及抗体医药的制程中生产的抗体单体与其聚合物的分离法

说明书

本发明提供一种可适合用于精制抗体医药的阳离子交换色谱法用载体、特别是抗体医药的制造过程中所生产的抗体单体与其聚合物的分离法性能良好的阳离子交换色谱法用载体。本发明的阳离子交换色谱法载体是以单体整体的30～100mol％的范围含有下述式(1)或(2)所示的至少1种强阳离子性单体单元的聚合物结合于包含多孔性粒子的基础载体而成的抗体精制用阳离子交换色谱法载体，且其离子交换容量为60～300μmol/ml。[式中，R¹、R²及R³分别独立为氢原子或甲基，A¹及A²为‑R⁴‑SO₃M，此处，R⁴为C₂～C₄的亚烷基，M为氢原子、钠或钾]。

技术领域

本发明涉及一种抗体医药的精制步骤中所使用的阳离子交换色谱法载体及抗体医药的制造过程中所生产的抗体单体与其聚合物的分离方法。

背景技术

使用色谱法进行生物医药品的精制已众所周知，且利用各种分子间相互作用而进行目标物与杂质的分离。作为例，有利用离子交换色谱法的静电相互作用的分离方法、利用疏水色谱法的疏水性相互作用的分离方法及利用蛋白A色谱法等的对抗体的亲和相互作用的分离方法等。

在抗体医药的制造中，重要的是提供纯度高的制品，其精制工艺是将蛋白A色谱法、阳离子交换色谱法及阴离子交换色谱法等组合而实施。其中，作为杂质之一的抗体聚合物生产于培养或精制阶段，可认为是抗原辨识能力降低或产生副作用的原因，去除该抗体聚合物于抗体医药制造中成为重要的管理项目。

在生物技术与生物工程(Biotechnology and Bioengineering)108，1494-1508，2011(非专利文献1)中报告有抗体聚合物的生成机制及聚合物去除的重要性等，但存在如下问题：抗体聚合物在利用蛋白A色谱法的亲和精制步骤中无法去除。因此，在利用蛋白A色谱法的精制步骤以后的步骤中将抗体与其聚合物进行分离而获得纯度高的抗体对抗体医药厂商而言成为重要的课题。

为了此种目的，例如在非专利文献1中提出有利用具有混合模式(mix-mode)型配体的色谱法载体进行抗体与其聚合物的分离。另外，在J.Chromatography A，1217，216-224，2010(非专利文献2)及J.Chromatography A，1216，902-909，2009(非专利文献3)中提出有利用疏水(苯基)色谱法载体进行抗体与其聚合物的分离。但是，这些使用载体的分离方法存在较多实用性课题，例如，成为目标物的抗体的吸附容量低，或者是在高盐浓度下使用。

阳离子交换色谱法是用以去除抗体聚合物、来自宿主的蛋白质、及蛋白A泄露，该阳离子交换色谱法廉价，且在制造大量生物制剂时使用实绩高，从而在蛋白A色谱法以后的精制步骤中成为非常重要的步骤。因此，期望利用阳离子交换色谱法处理尽量地减少在抗体医药的制造过程中产生的抗体聚合物或来自宿主的蛋白质等杂质。

关于阳离子交换色谱法对抗体精制的适应性，例如在国际公开第2010/127069号手册(专利文献1)中揭示有胰岛素样生长因子-1受体(Insulin-like Growth Factor-1Receptor，IGFlR)的精制，且揭示有对去除抗体聚合物等杂质有效的阳离子交换体的使用。

但是，在用于抗体医药制造的情况下，对于阳离子交换色谱法载体而言，不仅要求与杂质的分离性能，就生产性的观点而言，还要求抗体的吸附量高，进而可在不压缩的情况下以高流速进行处理。