[发明专利]因子VII多肽的液体药物组合物

说明书

技术领域

本发明涉及包含因子VII（a）多肽的液体、含水药物组合物；制备和使用该组合物的方法；包含该组合物的容器和该组合物用于治疗因子VII（a）反应性病症的用途。更具体地，本发明涉及对蛋白水解、化学和/或物理降解稳定的液体组合物。

技术背景

凝血因子VIIa（FVIIa）已被证明是用于血液凝固病症诸如血友病A、血友病B、血小板无力症和FVII（a）缺乏症的治疗的重要的治疗剂。

目前市售的，重组因子VIIa制剂NovoSevenRT?（Novo Nordisk A/S，丹麦）呈现为含重组人因子VIIa、NaCl、CaCl₂(2H₂O)、GlyGly、聚山梨醇酯80、蔗糖和甘露糖醇的冷冻干燥饼的小瓶。此产品在使用前立即用组氨酸缓冲液重构至pH6.0，从而在得到的溶液中获得1.0 mg/mL的FVIIa浓度。

在液体中维持制造的蛋白药物，还是冷冻干燥它的决定通常基于该蛋白以这两种形式的稳定性。蛋白稳定性可被下列因素影响，诸如离子强度、pH、温度、冷冻和解冻的重复循环、暴露于剪切力和蛋白本身的性质。某些活性蛋白可能丢失，由于物理不稳定性导致变性和聚集（可溶性和不溶性聚集体形成两者），以及化学不稳定性导致例如，水解、脱酰胺作用和氧化作用，仅举几例。

虽然蛋白不稳定的发生被广泛认识到，但是一般不可能预测什么可能是解决具体蛋白的具体不稳定性相关问题的有效方法。不稳定可以导致具有降低的活性、增加的毒性，和/或增加的免疫原性的蛋白副产物或衍生物的形成。另外，翻译后修饰，诸如在N-末端的某些谷氨酸残基的γ-羧基化，或碳水化合物侧链的添加，在储存过程中提供潜在的修饰位点。

然而，丝氨酸蛋白酶（诸如因子VIIa多肽）的液体制剂，提示不同的稳定性问题，因为它们都经受自体溶解的降解，通过作为它们自身催化（作为生物酶和底物两者）的底物。

配制蛋白酶（诸如FVIIa多肽）对于制药业是一个重大的挑战，因为FVIIa多肽容易裂解同一制剂中的其它FVIIa多肽，使它们失活。在液体制剂中，FVIIa多肽可以在几个小时的时期内自体溶解，并且当FVIIa多肽的浓度高时问题尤为严重。因此，在FVIIa多肽液体制剂的创造中，自体溶解是要克服的最大障碍。

任何蛋白组合物的安全性和有效性直接与其稳定性相关。由于对于分子运动大大增加的潜力和因此增加的分子相互作用的可能性，维持液体中蛋白稳定性需要与用于以其冻干形式维持稳定性的方法不同的方法。由于在增加的蛋白浓度下对于聚集体形成的倾向和增加的蛋白-蛋白相互作用，在浓溶液中保持稳定性，构成单独的挑战。

当开发液体组合物时，考虑许多因素。获得短期（少于六个月）的液体稳定性一般需要避免总体结构变化，诸如变性和聚集。对于一些蛋白，这些方法描述于文献中，并且存在很多稳定剂的实例。众所周知有效地稳定一种蛋白的试剂实际上起到使另一种不稳定的作用。一旦蛋白被稳定化免于总体结构变化，对于长期稳定性（例如，大于6个月）开发液体组合物，取决于进一步稳定化蛋白免于特异性针对该蛋白的降解类型。更具体的降解类型可以包括，例如，二硫键错配（scrambling）、某些残基的氧化、脱酰胺和环化。虽然并不总是能够准确描述个别的降解种类，但是开发了测定法监测细微变化，以便监测特定赋形剂的专门稳定目的蛋白的能力。

对于注射/输注，液体组合物的pH以及离子强度还需要在生理学上适当的范围内。

因子VIIa经历几个降解途径，尤其是自体溶解切割（肽骨架的剪裁或“重链降解”）、聚集（形成二聚、寡聚和多聚形式）和氧化。此外，可发生沉淀和脱酰胺。许多这些反应可以通过从蛋白除去水而显著减缓。

然而，存在与使用保存的液体制剂而不是在注射前立即用合适的液体（例如，WFI或缓冲液）重构的冷冻干燥饼相关的几个优点。最值得注意的是，保存的液体比冷冻干燥产品更便于使用。因子VIIa多肽的液体组合物的开发可以消除重构误差，从而提高给药精度；以及简化产品的临床使用，从而增加患者的依从性。通常，更高度浓缩的溶液允许更低体积的施用，其可以提供用于除了静脉内之外的肠胃外施用的机会。在易于施用和使用方面，液体组合物从而可具有相对冷冻干燥产品的许多优点。

目前，没有市售的液体配制的FVIIa产品。本发明的目的是提供适合用于储存和递送的液体因子VIIa多肽药物组合物，并且其中化学和/或物理降解产物的量是生理上可接受的。