[发明专利]NADP(H)传感器和醇脱氢酶的研发

权利要求书

1.一种NADP(H)纳米传感器，其包含

i)结合调节物的核酸序列，其中调节物的氧化状态取决于NADP(H)的可用性；

ii)接在核酸序列i)之后的启动子序列，所述启动子序列能够与RNA聚合酶结合，其中RNA聚合酶对启动子序列的亲和力受调节物的氧化状态影响；

iii)处于启动子序列ii)控制下并编码自发荧光蛋白的核酸序列，

其中调节物是来自大肠杆菌的Sox调节蛋白SoxR并且启动子序列是来自大肠杆菌的soxS启动子序列，

其中组分i)和ii)由来自大肠杆菌的基因间区形成，所述基因间区位于soxR和soxS之间并且包含SoxR结合序列、接在SoxR结合序列之后的soxS启动子序列和接在soxS启动子序列之后的在mRNA水平对应于核糖体结合位点的序列，或由与所述基因间区同源的核酸序列形成，

其中组分i)和ii)由根据SEQ.ID.No.01的核酸序列形成。

2.根据权利要求1所述的NADP(H)纳米传感器，其包含

(α1)来自大肠杆菌的soxR基因或与此同源的核酸序列；

(α2)在(α1)之后的来自大肠杆菌的基因间区，所述基因间区位于soxR和soxS之间并且包含作为组分i)的SoxR结合序列、接在SoxR结合序列之后的作为组分ii)的soxS启动子序列和接在soxS启动子序列之后的在mRNA水平对应于核糖体结合位点的序列，或与所述基因间区同源的核酸序列；

(α3)根据需要，在(α2)之后的来自大肠杆菌的soxS基因的部分序列或与此同源的核酸序列；

(α4)在(α2)或(α3)之后的编码自发荧光蛋白并处于soxS启动子序列控制下的核酸序列，作为组分iii)。

3.根据权利要求1所述的NADP(H)纳米传感器，其包含

(β1)来自大肠杆菌的soxR基因或与此同源的核酸序列；

(β2)在(β1)之后的来自大肠杆菌的基因间区，所述基因间区位于soxR和soxS之间并且包含作为组分i)的SoxR结合序列、接在SoxR结合序列之后的作为组分ii)的soxS启动子序列和接在soxS启动子序列之后的在mRNA水平对应于核糖体结合位点的序列，或与所述基因间区同源的核酸序列；

(β3)在(β2)之后并处于soxS启动子序列控制下的来自大肠杆菌soxS基因的序列、这个基因的部分序列或与此同源的核酸序列；

(β3')在(β3)之后的在mRNA水平对应于核糖体结合位点的其他序列；

(β4)在(β3')之后的编码自发荧光蛋白并处于soxS启动子序列控制下的核酸序列，作为组分iii)。

4.根据权利要求2或3所述的NADP(H)纳米传感器，其中组分(α1)或(β1)选自：

a)根据SEQ.ID.No.02的核酸序列，和

b)编码具有根据SEQ.ID.No.03的氨基酸序列的多肽的核酸序列。

5.根据权利要求1所述的NADP(H)纳米传感器，其中编码自发荧光蛋白的核酸序列(iii)选自编码绿色荧光蛋白、黄色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白和青色荧光蛋白的基因。

6.根据权利要求5所述的NADP(H)纳米传感器，其中编码自发荧光蛋白的核酸序列(iii)选自编码DsRed、HcRed、AsRed、AmCyan、ZsGreen、AcGFP和ZsYellow的基因。

7.根据权利要求5所述的NADP(H)纳米传感器，其中编码自发荧光蛋白的核酸序列(iii)是编码增强型绿色荧光蛋白、增强型黄色荧光蛋白、增强型蓝色荧光蛋白、增强型青色荧光蛋白的基因。

8.细胞，其包含根据权利要求1至7中任一项所述的NADP(H)纳米传感器。

9.根据权利要求8所述的细胞，其中NADP(H)纳米传感器以附加体形式或染色体形式存在于细胞中。