[发明专利]用于增强PCR特异性的新颖组合物、方法和试剂盒

权利要求书

1.一种寡核苷酸引物，其包含5'序列靶向扩增限制性标签序列（STAR标签序列）和目标核酸杂交序列，其中所述STAR标签序列能够在所述寡核苷酸引物沿着所述目标核酸的延伸之后形成茎-环结构，

其中所述STAR标签序列包含与和所述寡核苷酸引物一起用于扩增反应中的第二引物的目标核酸杂交部分的全部或一部分相同的序列，或

其中所述STAR标签序列与和所述寡核苷酸引物一起用于扩增反应中的第二引物的全部或一部分互补；

并且其中所述寡核苷酸引物和所述第二引物是正向和反向扩增引物对，

并且其中所述STAR标签序列和所述第二引物的目标核酸杂交部分之间的相同或互补序列的长度是11、12或13个核苷酸。

2.根据权利要求1所述的寡核苷酸引物，其中所述STAR标签序列还包含所述目标核酸的内部扩增子序列的一部分。

3.根据权利要求1所述的寡核苷酸引物，其中所述STAR标签序列包含与所述第二引物的目标核酸杂交部分的全部或一部分相同的序列和所述目标核酸的内部扩增子序列。

4.根据权利要求1所述的寡核苷酸引物，其中所述STAR标签序列包含与所述第二引物的全部或一部分互补的序列和所述目标核酸的内部扩增子序列。

5.根据权利要求1所述的寡核苷酸引物，其中所述STAR标签序列的长度是10到40个核苷酸。

6.一种组合物，其包含(i)第一寡核苷酸引物和(ii)第二寡核苷酸引物，其中所述第一引物包含5'序列靶向扩增限制性标签序列（STAR标签序列）和目标核酸杂交序列，所述第二寡核苷酸引物包含目标核酸杂交序列，所述STAR标签序列与所述第二寡核苷酸引物的所述目标核酸杂交序列的全部或一部分相同，并且所述STAR标签序列能够在所述第一寡核苷酸引物沿着所述目标核酸的延伸之后形成茎-环结构，所述第一寡核苷酸引物和所述第二寡核苷酸引物是正向和反向扩增引物对，其中所述STAR标签序列和所述第二寡核苷酸引物的目标核酸杂交序列之间的相同序列的长度是11、12或13个核苷酸。

7.根据权利要求6所述的组合物，还包含一种多核苷酸延伸产物，所述多核苷酸延伸产物包含在5'端的STAR标签序列和与所述STAR标签序列的3'侧的所述STAR标签序列互补的序列，其中所述STAR标签序列和所述互补序列使得所述延伸产物能够形成茎-环结构。

8.根据权利要求6所述的组合物，其中所述STAR标签序列的长度是10到40个核苷酸。

9.一种抑制或实质上阻断目标核酸的不当扩增的方法，所述方法包含：

使所述目标核酸与根据权利要求1所述的寡核苷酸引物杂交；

使所述寡核苷酸引物延伸以形成延伸产物；

在扩增条件下，使所述延伸产物与扩增反应混合物一起培育，所述扩增反应混合物包含所述第二引物，其中所述第二引物包含目标核酸杂交序列；以及

检测存在或不存在所述延伸产物；

其中所述STAR标签序列和所述第二寡核苷酸引物的目标核酸杂交序列之间的相同或互补序列的长度是11、12或13个核苷酸。