[发明专利]评价细胞因子对细胞色素P450的代谢能力产生的影响的方法和药剂的筛选方法

权利要求书

1.一种评价细胞因子对细胞色素P450的代谢能力产生的影响的方法，

该方法使球状体形状的株化肝细胞与包含细胞因子的试验溶液在培养容器内接触1小时以上且小于96小时后，评价细胞色素P450的代谢功能的诱导或衰减的有无。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，由所述株化肝细胞形成的球状体的直径的平均值为50μm以上且小于200μm，并且具有半值宽度范围内的直径的球状体为全部球状体的70％以上。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述试验溶液为无血清培养基。

4.根据权利要求1至3中的任一项所述的方法，其特征在于，以健康人的细胞因子的血药浓度的平均值的0.1倍至50倍的范围中的一个浓度为基准，使用所述试验溶液的细胞因子浓度为所述基准的1倍、10倍、100倍至少这3种浓度的包含所述细胞因子的各试验溶液。

5.根据权利要求1至3中的任一项所述的方法，其特征在于，以所述细胞因子在被分泌的疾病患者的血药浓度的平均值的0.1倍至50倍的范围中的一个浓度为基准，使用所述试验溶液的细胞因子的浓度为所述基准的1倍、10倍、100倍至少这3种浓度的包含细胞因子的各试验溶液。

6.根据权利要求1至5中的任一项所述的方法，其特征在于，在同一孔内进行将所述株化肝细胞培养为球状体形状的工序、和使球状体形状的所述株化肝细胞和包含所述细胞因子的所述试验溶液接触1小时以上且小于96小时的工序。

7.根据权利要求1至6中的任一项所述的方法，其特征在于，使用具有多个孔的培养板的一个孔作为所述培养容器来进行如下工序：

在所述一个孔内，在包含10％血清的培养基中形成所述株化肝细胞的球状体的工序；

从所述一个孔吸取所述培养基的工序；

向所述一个孔中添加包含所述细胞因子的所述试验溶液的工序；和

在所述一个孔内，使包含所述细胞因子的所述试验溶液与所述球状体接触1小时以上且小于96小时的工序。

8.根据权利要求1至7中的任一项所述的方法，其特征在于，所述培养容器以在具有多个孔的培养板的各孔内具有多个培养空间的方式形成，

各培养空间为包括具有当量直径的长度的面和高度的空间，所述高度除以所述当量直径所得的值为0.3至2的范围，

在所述培养空间的底配置有至少2个以上的所述当量直径为100μm至1000μm的范围的培养空间。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述多个培养空间的隔开相邻的所述培养空间的壁的厚度为2μm至50μm的范围。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于，隔开所述培养空间的壁的上表面与侧面所成的角度为90度至135度的范围。

11.根据权利要求8至10中的任一项所述的方法，其特征在于，所述多个培养空间的底的表面通过玻璃处理被处理成水接触角为45度以下。

12.根据权利要求8至11中的任一项所述的方法，其特征在于，所述多个培养空间的底的表面通过等离子体处理形成官能团而被处理成水接触角为45度以下。

13.根据权利要求1至12中的任一项所述的方法，其特征在于，所述培养容器的表面固定化有聚合物，所述聚合物为选自通过聚合物温度、光中的任一者而亲水性和疏水性变化的聚合物、抑制细胞粘附的亲水性的聚合物链、磷脂、磷脂-高分子复合体、聚(甲基丙烯酸2-羟乙酯)(PHEMA)、聚乙烯醇、琼脂糖、脱乙酰壳多糖、聚乙二醇和白蛋白的组中的一者或为包含其组合的聚合物。

14.根据权利要求1至12中的任一项所述的方法，其特征在于，所述培养容器的表面固定化有聚合物的混合物，所述混合物为选自抑制细胞粘附的亲水性的聚合物链、磷脂、磷脂-高分子复合体、聚(甲基丙烯酸2-羟乙酯)(PHEMA)、聚乙烯醇、琼脂糖、脱乙酰壳多糖、聚乙二醇和白蛋白的组中的一者或包含它们的组合的聚合物；与促进细胞粘附性的聚合物、即选自多聚-L-赖氨酸、多聚-L-赖氨酸、胶原蛋白、层粘连蛋白和纤连蛋白中的一者或包含它们的组合的聚合物的混合物。