[发明专利]基因工程酵母

权利要求书

1.一种基因修饰酵母细胞，其包含生产3-HP的活性发酵通路，其中所述细胞包含并表达编码用于产生酶的外源性基因，所述酶与SEQ ID NO：1具有至少80％同一性并催化β-丙氨酸和丙酮酸之间的氨基转移反应以产生丙二酸半醛。

2.根据权利要求1所述的基因修饰酵母细胞，其中所述酶是来自蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)AH1272的转氨酶YhxA。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的基因修饰酵母细胞，其表达3-羟基异丁酸脱氢酶即HIBADH。

4.根据权利要求3所述的基因修饰酵母细胞，其中所述HIBADH来自铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、恶臭假单胞菌(P.putida)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)或白色念珠菌(Candida albicans)。

5.根据前述权利要求中任一项所述的基因修饰酵母细胞，其表达3-羟基丙酸脱氢酶即3-HPDH。

6.根据权利要求5所述的基因修饰酵母细胞，其中所述3-HPDH来自勤奋生金球菌(Metallosphaera sedula)、头寇岱硫化叶菌(Sulfolobus tokadaii)或大肠杆菌(E.coli)。

7.根据前述权利要求中任一项所述的基因修饰酵母细胞，其表达产生天冬氨酸-1-脱羧酶即EC 4.1.1.11的外源性基因，和/或表达产生谷氨酸脱羧酶即EC 4.1.1.15的外源性基因。

8.根据权利要求7所述的基因修饰酵母细胞，其表达来自谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)的天冬氨酸-1-脱羧酶(SEQ ID NO52)或具有天冬氨酸-1-脱羧酶活性且与SEQ ID NO52至少80％同源的酶。

9.根据权利要求7所述的基因修饰酵母细胞，其表达来自赤拟谷盗(Tribolium castaneum)的天冬氨酸-1-脱羧酶(SEQ ID NO68)或具有天冬氨酸-1-脱羧酶活性且与SEQ ID NO68至少80％同源的酶。

10.根据权利要求7所述的基因修饰酵母细胞，其具有增加的丙酮酸羧化酶和/或天冬氨酸转氨酶活性。

11.根据权利要求10所述的基因修饰酵母细胞，其过表达天然丙酮酸羧化酶PYC1或PYC2和/或天然天冬氨酸转氨酶AAT2。

12.根据前述权利要求中任一项所述的基因修饰酵母细胞，其中酵母是酿酒酵母(S.cerevisiae)。

13.一种生产3HP的方法，其包括培养前述权利要求中任一项所述的酵母细胞，和从培养物回收3HP。

14.根据权利要求13所述的方法，其包括为培养物供应β-丙氨酸和/或L-天冬氨酸。

15.根据权利要求13或权利要求14所述的方法，其中每升培养基生产至少100mg 3HP或从每升所述培养基回收至少100mg 3HP。