[发明专利]使用miRNA的癌症疗法

说明书

本发明总体上涉及使用微小RNA miR‑7‑5p治疗表达1型胰岛素样生长因子受体(IGF1R)或IGF1R信号传导通路的成分的癌症，特别是黑色素瘤的方法和组合物。还提供用于增加这类癌症对治疗剂的敏感性的方法。

技术领域

本发明总体上涉及使用微小RNA miR-7-5p治疗表达1型胰岛素样生长因子受体(IGF1R)或IGF1R信号传导通路的成分的癌症，特别是黑色素瘤的方法和组合物。还提供用于增加这类癌症对治疗剂的敏感性的方法。

相关申请

本申请要求2012年10月18日提交的题为“Cancer Therapy Using miRNAs”的澳大利亚临时申请号2012904570的优先权。澳大利亚临时申请号2012904570的主题以引用的方式整体并入本文。

背景技术

黑色素瘤是最具侵袭性形式的皮肤癌并且是全世界日益增加的健康问题，发病率呈逐年上升趋势。一旦黑色素瘤已经转移，几乎不存在有效治疗，并且死亡率较高。黑色素瘤能够快速转移并且经常是常规化学疗法和放射疗法难治的。这种抗性是改善患者存活的主要障碍，并且随着有效治疗剂的缺乏，需要开发新颖的、治疗有效的治疗方法来治疗黑色素瘤。

对黑色素瘤的分子生物学，包括作为潜在药物靶标的基因突变和在黑色素瘤中活化的特定信号传导通路(如胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)通路)的鉴定的理解增加为开发改善的疗法提供希望。IGF1R与良性痣相比在恶性黑色素瘤中过度表达并且介导过程如存活、增殖和运动。IGF1R刺激导致两个主要下游信号传导通路的活化：PI3K-Akt_TOR通路和Ras-Raf-MEK-ERK通路，所述两种通路对于黑色素瘤发病机制是重要的。突变发生在这些通路的关键分子中，包括NRAS(9％-15％的黑色素瘤)、BRAF(66％的黑色素瘤)和PTEN(30％-60％的黑色素瘤)，从而导致所述通路的组成型活化，促进细胞增殖、存活、迁移和侵袭。虽然使用突变体BRAF抑制剂PLX4032(RG7204/威罗菲尼(vemurafenib)/)的最近临床试验已经产生了转移性黑色素瘤肿瘤的急剧收缩，但是几乎所有患者发展抗性。重要的是，IGF1R信号传导的上调是对BRAF抑制的ERK独立的抗性。因此，IGF1R及其下游信号传导通路是癌症治疗的潜在靶标。

微小RNA(miRNA)是至少部分地通过其经由miRNA的“种子区”结合靶基因的3′-UTR的能力调控mRNA降解和翻译两者的一类高度保守的小型(通常21-25个核苷酸)非编码RNA。miRNA是从通常包含从非编码DNA的区域转录的几百个核苷酸的RNA前体(初始-miRNA)产生。初始-miRNA在细胞核中通过RNA酶III核酸内切酶加工以形成大约70个核苷酸的茎-环前体(前体-miRNA)。前体-miRNA被主动地转运至细胞质中，在细胞质中它们被进一步加工成通常21-23个核苷酸的短RNA双链体。功能性miRNA链从其互补非功能性链解离并且位于RNA-诱导的沉默复合物(RISC)内。(或者，RISC可直接负载前体-miRNA发夹结构。)miRNA结合靶mRNA的3′UTR并且在所述结合中重要的是在miRNA的5′末端附近的大约6-7个核苷酸的“种子区”(通常核苷酸位置2至8)。miRNA-诱导的基因表达调控通常通过翻译阻抑实现，从而在蛋白质从核糖体或“冻结”核糖体出现时降解蛋白质、和/或促进靶mRNA移动到RNA破坏的位点。

miRNA对于许多正常细胞功能来说是重要的，并且参与过程如干细胞分裂、胚胎发育、细胞分化、炎症和免疫。越来越多地，特定miRNA和个体miRNA的表达模式和改变的表达调控也被牵涉在多种疾病病状(包括癌症)中。miR-7-5p被表征为几种癌症类型中的肿瘤抑制miRNA，其中其靶向且阻抑分子如IGF1R(胰岛素样生长因子1受体)、PAK1(p21-活化激酶1)、IRS-1/2(胰岛素受体底物1和2)、EGFR(表皮生长因子受体)、FAK(粘着斑激酶)和RAF1(v-raf-1鼠白血病病毒致癌基因同源物1)。

发明内容