[发明专利]具有小型启动子盒的逆转录病毒载体

权利要求书

1.具有复制能力的重组γ逆转录病毒，其包含：

逆转录病毒GAG蛋白；

逆转录病毒POL蛋白；

逆转录病毒包膜；

逆转录病毒多核苷酸，其包含位于所述逆转录病毒多核苷酸序列3'端的长末端重复(LTR)序列、位于所述逆转录病毒多核苷酸5'端的启动子序列、gag核酸结构域、pol核酸结构域和env核酸结构域，所述启动子适于在哺乳动物细胞中表达；

治疗盒，其包含具有可操作地连接至异源多核苷酸的小型启动子的至少一个小型启动子盒，其中所述治疗盒位于3'LTR的5'端和编码所述逆转录病毒包膜的env核酸结构域的3'端，并且其中当仅有一个小型启动子盒存在时，所述异源多核苷酸的长度为1.2kb至2.0kb；以及

在靶细胞中逆转录、包装和整合所必需的顺式作用序列。

2.重组复制型逆转录病毒载体，其包含：

逆转录病毒GAG蛋白；

逆转录病毒POL蛋白；

逆转录病毒包膜；

逆转录病毒多核苷酸，其包含位于所述逆转录病毒多核苷酸序列3'端的长末端重复(LTR)序列、位于所述逆转录病毒多核苷酸5'端的启动子序列、gag核酸结构域、pol核酸结构域和env核酸结构域，所述启动子适于在哺乳动物细胞中表达；

治疗盒，其包含含有可操作地连接至异源多核苷酸的小型启动子的小型启动子盒，其中所述小型启动子盒位于3'LTR的5'端和编码所述逆转录病毒包膜的env核酸结构域的3'端，其中所述小型启动子缺少SCP1，Ad或CMV核心启动子；以及

在靶细胞中逆转录、包装和整合所必需的顺式作用序列。

3.如权利要求1或2所述的逆转录病毒，其中所述逆转录病毒多核苷酸序列源自选自以下的病毒：鼠白血病病毒(MLV)，莫洛尼鼠白血病病毒(MoMLV)，猫白血病病毒(FeLV)，狒狒内源性逆转录病毒(BEV)，猪内源性病毒(PERV)，源自猫的逆转录病毒RD114，松鼠猴逆转录病毒，禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)，或长臂猿白血病病毒(GALV)。

4.如权利要求1或2所述的逆转录病毒，其中所述逆转录病毒包膜为兼嗜性MLV包膜。

5.如权利要求1或2所述的逆转录病毒，其中所述靶细胞为具有细胞增殖性病症的细胞。

6.如权利要求1或2所述的逆转录病毒，其中所述靶细胞为赘生性细胞。

7.如权利要求5所述的逆转录病毒，其中所述细胞增殖性病症选自：肺癌，结肠-直肠癌，乳腺癌，前列腺癌，尿道癌，子宫癌，脑癌，头颈癌，胰腺癌，黑素瘤，胃癌和卵巢癌，淋巴瘤，白血病，类风湿性关节炎或其它自身免疫性疾病。

8.如权利要求1或2所述的逆转录病毒，其中所述启动子序列与生长调控基因相关。

9.如权利要求1或2所述的逆转录病毒，其中所述启动子序列包含组织特异性启动子序列。

10.如权利要求9所述的逆转录病毒，其中所述组织特异性启动子序列包含至少一个雄激素应答元件(ARE)。

11.如权利要求9所述的逆转录病毒，其中所述组织特异性启动子序列包含至少一个糖皮质激素应答元件。

12.如权利要求1或2所述的逆转录病毒，其中所述启动子包含CMV-R-U5结构域多核苷酸。

13.如权利要求12所述的逆转录病毒，其中所述CMV-R-U5结构域包含连接至MLV R-U5区的来自人巨细胞病毒的立即早期启动子。

14.如权利要求1或2所述的逆转录病毒，其中所述gag多核苷酸源自γ逆转录病毒。

15.如权利要求1或2所述的逆转录病毒，其中所述pol多核苷酸结构域源自γ逆转录病毒。

16.如权利要求1或2所述的逆转录病毒，其中所述小型启动子是核心启动子。

17.如权利要求1，2或16所述的逆转录病毒，其中所述小型启动子是优化的核心启动子。

18.前述权利要求中任一项所述的逆转录病毒，其中所述治疗盒包含(a)至少两个小型启动子盒，(b)至少一个小型启动子盒和polIII启动子盒，或(c)至少一个小型启动子盒和IRES盒。