[发明专利]特异性结合人和小鼠L1CAM的抗体及其用途

说明书

本发明涉及特异性结合人和小鼠L1CAM的新型抗体，并且更具体地，涉及以高亲和力既结合人L1CAM又结合小鼠L1CAM的抗体、编码所述抗体的多核苷酸、包括所述多核苷酸的表达载体、导入了所述载体的转化体、包括所述抗体的用于预防或治疗癌症的药物组合物、使用所述抗体用于治疗癌症的方法、包括所述抗体的用于诊断癌症的组合物、包括所述组合物的用于诊断癌症的试剂盒、使用所述抗体用于给癌症诊断提供信息的方法以及通过将药物缀合至所述抗体所制备的抗体‑药物缀合物，所述抗体通过修饰包括SEQ ID NO.1的重链可变区和SEQ ID NO.5的轻链可变区的L1CAM(L1细胞粘附分子)‑特异性抗体的序列进行制备。

技术领域

本发明涉及特异性结合人和小鼠L1CAM的新型抗体，并且更具体地，涉及以高亲和力既结合人L1CAM又结合小鼠L1CAM的抗体、编码所述抗体的多核苷酸、包括所述多核苷酸的表达载体、导入了所述载体的转化体、包括所述抗体用于预防或治疗癌症的药物组合物、使用所述抗体用于治疗癌症的方法、包括所述抗体用于诊断癌症的组合物、包括所述组合物用于诊断癌症的试剂盒、使用所述抗体用于给癌症诊断提供信息的方法以及通过将药物缀合至所述抗体所制备的抗体-药物缀合物，所述抗体通过修饰包括SEQ ID NO.1的重链可变区和SEQ ID NO.5的轻链可变区的L1CAM(L1细胞粘附分子)-特异性抗体的序列进行制备。

背景技术

L1细胞粘附分子(L1CAM,CD171)是免疫球蛋白超家族细胞粘附分子(celladhesion molecules，CAMs)之一，在细胞表面上介导细胞对细胞粘附，并且是具有200至220kDa分子量的糖蛋白。最初知道L1CAM为介导神经元与神经元粘附并涉及神经突起和神经元迁移的蛋白质(Lee等，PNAS 74，5021，1997；McGuire and Greene 15，357，1978)。人L1CAM是1型整合膜糖蛋白，其由1,257个氨基酸组成并跨越细胞膜一次，并且其氨基末端部分存在于细胞膜外，其羧基末端部分存在于细胞质中。细胞外结构域含有六个2型免疫球蛋白结构域、五个纤连蛋白III样结构域和二十个N-糖基化位点。

除了在正常人脑中的最高表达之外，在一些造血细胞和肾细胞、外周神经和神经节也发现L1CAM的表达，但在其它正常细胞中没有发现(Huszar等，Human Pathology 37，1000-1008,2006)。最近，已经报道在癌细胞(如黑色素瘤、神经母细胞瘤、卵巢癌、结肠癌、胰腺癌和子宫内膜癌)中发现L1CAM的过表达，L1CAM在癌细胞的生长和转移中发挥重要作用，并且L1CAM的过表达与癌症的预后不良有关。由于该原因，L1CAM已经成为癌症治疗中的靶标(Raveh等，Cancer Letters 282:137-145，2009)。

已经有许多关于使用L1CAM抗体诊断和治疗癌症的报道。例如欧洲专利号EP1172654和美国专利号7618785公开了用于卵巢或子宫内膜肿瘤的诊断和预后的方法，其特征在于，基于L1CAM的存在指示卵巢或子宫内膜肿瘤的存在，L1CAM抗体被用于确定患者样品中L1CAM的存在和水平，以及通过向该所述患者施用所述L1CAM抗体和细胞毒药物的复合物来治疗所述肿瘤的方法。而且，美国专利公开号2004/0115206公开了通过用有效量的能够在肿瘤细胞中抑制细胞生长或诱导细胞死亡的抗L1CAM的抗体接触所述肿瘤细胞用于在所述肿瘤细胞中抑制细胞生长或诱导细胞死亡的方法。此外，国际专利公开号WO2006/013051提供了抑制在卵巢和子宫内膜癌中过表达的L1CAM蛋白及其表达的组合物，以及使用所述组合物用于预防和治疗卵巢和子宫内膜癌的方法。该专利描述了包括抗L1CAM的抗体或其衍生物的组合物抑制卵巢和子宫内膜癌并阻断癌细胞的迁移，从而实现癌症的治疗功能。而且，本发明人证实了L1CAM表达于胆管癌，并涉及胆管癌细胞的增殖和迁移，并且胆管癌细胞的生长被抗L1CAM的单克隆抗体抑制，表明L1CAM和胆管癌之间存在相关性(韩国专利号10-756051和10-0931976)。